Anticorpo Policlonal Anti-Fosfo-EIF4B-S422 para WB, ELISA - P23588

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do EIF4B

• O EIF4B é um fator eucariótico de iniciação de tradução necessário para a ligação do mRNA aos ribossomas.
• Funciona em estreita associação com o EIF4F e o EIF4A, ligando-se perto da extremidade 5' terminal do mRNA na presença de EIF4F e ATP.
• O EIF4B promove a atividade ATPase e a atividade de desenrolamento de RNA dependente de ATP tanto do EIF4A como do EIF4F.
• O gene EIF4B sofre splicing alternativo, produzindo múltiplas isoformas.
• A proteína está sujeita a modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação e ubiquitinação (conjugação Ubl).
• O sequenciamento direto de proteínas e a identificação por proteómica confirmam a sua expressão em células humanas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi produzido contra um peptídeo fosfo sintético que representa o local de fosforilação em S422; deve detetar especificamente o EIF4B endógeno apenas quando fosforilado neste resíduo.
• Para Western blot, considere o uso de inibidores de fosfatases durante a preparação da amostra para preservar o estado de fosforilação. Valide a especificidade tratando os lisados celulares com λ-fosfatase ou por competição com o peptídeo não fosforilado.
• Em ELISA, o peptídeo fosforilado pode servir como antigénio de revestimento; inclua controlos apropriados usando o peptídeo não fosforilado para confirmar a dependência da fosforilação.
• Otimize a diluição do anticorpo e as condições de incubação no sistema de amostra relevante; a reatividade cruzada foi testada apenas para amostras humanas.

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