Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfo-eIF4E-S209 para WB, ELISA - P06730

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do eIF4E

• O fator de iniciação de tradução eucariótica 4E (eIF4E) é uma proteína de ligação à capa de mRNA de 25 kDa e a subunidade limitante da taxa do complexo eIF4F, que reconhece a capa 7-metilguanosina (m7G) e recruta ribossomos para a iniciação de tradução dependente da capa (PubMed:16271312, PubMed:22578813). Referências relacionadas: PMID:16271312 PMID:22578813
• No núcleo, o eIF4E promove a exportação de um subconjunto de mRNAs, incluindo CCND1, NOS2/iNOS e MDM2, via uma via dependente de XPO1, influenciando assim a progressão do ciclo celular e a apoptose (PubMed:23471078, PubMed:22684010). Referências relacionadas: PMID:23471078 PMID:22684010
• O eIF4E também regula o splicing de mRNA, o processamento da extremidade 3' e a captação em estado estacionar, controlando a exportação nuclear e a tradução de mRNAs da maquinaria de splicing e captação (PubMed:11606200). Referências relacionadas: PMID:11606200
• Juntamente com o EIF4G1, o eIF4E antagoniza a varredura e é necessário para a tradução mediada pelo elemento TISU, um mecanismo de iniciação dependente da capa, mas independente de varredura (PubMed:29987188). Referências relacionadas: PMID:29987188
• No citoplasma, o eIF4E é um componente dos corpos P e dos grânulos de estresse, onde participa da repressão traducional e do armazenamento de mRNA, regulando assim a estabilidade do mRNA (PubMed:24335285). Referências relacionadas: PMID:24335285
• O eIF4E está sujeito a fosforilação em múltiplos sítios, incluindo S209, o que modula sua afinidade de ligação à capa e sua atividade traducional; acetilação também foi relatada.
• A proteína está associada ao transtorno do espectro autista (AUTS19) e desempenha papéis nas interações hospedeiro-vírus, destacando sua ampla significância biológica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi produzido contra um peptídeo fosforilado sintético correspondente aos resíduos circundantes ao S209; é recomendado para detectar eIF4E fosforilado em S209, e não o eIF4E total.
• Para Western blot, considere o bloqueio com BSA em vez de leite para reduzir o ruído de fundo devido à interferência de epítopos fosforilados. Um controle positivo, como lisatos de células estimuladas por soro, pode ser utilizado.
• O tratamento de lisatos celulares com fosfatase lambda pode servir como um controle negativo para confirmar o sinal dependente de fosforilação.
• O anticorpo foi validado para ELISA; para ensaios quantitativos, o emparelhamento com um anticorpo anti-eIF4E total pode fornecer uma referência de normalização.

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