Anti-Fosfo-ERK1-T202/Y204 + ERK2-T185/Y187 pAb de Coelho para WB, IF, ELISA - P28482 / P27361

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de ERK1/ERK2

• MAPK1 (ERK2, p42-MAPK) e MAPK3 (ERK1, p44-MAPK) são serina/treonina quinases que funcionam como o núcleo da cascata de sinalização MAPK/ERK, regulando o crescimento celular, adesão, sobrevivência e diferenciação através da fosforilação de mais de 160 substratos. Referências relacionadas: PMID:35831023
• Fosforila a fosfoglicerato quinase PGK1 em hipóxia, direcionando-a para as mitocôndrias para suprimir a produção de acetil-CoA a partir de piruvato. Referências relacionadas: PMID:26942675
• Localiza-se dinamicamente entre o citoplasma e o núcleo, e também é encontrada no citoesqueleto, centrossomo, adesões focais e caveolas, ligando a atividade da quinase a funções subcelulares específicas.
• A fosforilação dupla em Thr185/Tyr187 na ERK2 (e Thr202/Tyr204 na ERK1) é essencial para a ativação catalítica; este anticorpo reconhece especificamente o laço de ativação fosforilado.
• Atua como um repressor transcricional ligando-se diretamente a uma sequência de consenso de DNA [GC]AAA[GC], independente de sua atividade quinase.
• Desempenha papéis críticos na sinalização de receptores de tirosina quinase (por exemplo, KIT), sinalização de insulina e progressão do ciclo celular, e está implicado em vários cânceres e distúrbios do desenvolvimento.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopeptídeo sintético derivado do laço de ativação da ERK2 humana; espera-se reatividade cruzada com a região homóloga fosforilada da ERK1 devido à alta conservação da sequência.
• Em WB, bandas típicas aparecem em ~42 kDa (fosfo-ERK2) e ~44 kDa (fosfo-ERK1) após estimulação; confirme a especificidade fosfo comparando com lisados não tratados ou tratados com fosfatase.
• Para IF/ICC, considere a coloração simultânea com um anticorpo total de ERK1/ERK2 para validar o estado de ativação e a translocação subcelular.
• Bandas adicionais próximas a 36–43 kDa podem representar variantes de splicing, modificações pós-traducionais ou produtos de degradação; valide no sistema de amostra relevante.
• Aplicações de ELISA podem ser adequadas para a detecção quantitativa de ERK fosforilada em lisados celulares ou de tecidos; otimize as condições de revestimento e detecção adequadamente.

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