Anti-Fosfo-FGFR1 (Y653/Y654) Anticorpo Policlonal de Coelho para WB, ELISA - P11362

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do FGFR1

• O FGFR1 é um receptor de tirosina quinase de proteína na superfície celular para fatores de crescimento de fibroblastos, essencial para o desenvolvimento embrionário, proliferação, diferenciação e migração celular.
• A ligação do ligante desencadeia a ativação de múltiplas cascatas de sinalização, incluindo as vias PLCG1, RAS-MAPK (ERK) e AKT1, regulando a transcrição e o destino celular.
• O receptor localiza-se principalmente na membrana celular, mas também trafega para o núcleo, citoplasma e vesículas citoplasmáticas, contribuindo para a diversidade da sinalização.
• A expressão do FGFR1 é detectada em linhagens celulares de astrocitoma, neuroblastoma e córtex adrenal; certas isoformas estão presentes em fibroblastos de prepúcio.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação nos resíduos de tirosina Y653 e Y654 no loop de ativação, crítica para a atividade da quinase e sinalização a jusante.
• O FGFR1 está implicado em múltiplas doenças, incluindo craniossinostose, nanismo e síndrome de Kallmann, frequentemente devido a mutações de ganho de função ou rearranjos cromossômicos.
• O receptor é uma glicoproteína com propriedades de ligação à heparina e sofre ubiquitinação e internalização para a regulação negativa do sinal.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Use inibidores de fosfatases durante a lise celular e o preparo da amostra para preservar o estado de fosforilação do FGFR1.
• Inclua um controle negativo (por exemplo, lisato tratado com fosfatase lambda) para confirmar a especificidade fosfo-específica no Western blot.
• Otimize a diluição do anticorpo para seu ensaio específico; as diluições iniciais típicas para WB são de 1:500–1:2000, mas devem ser determinadas empiricamente.
• Valide a reatividade cruzada com o FGFR1 de camundongo em tecidos ou linhagens celulares de camundongo relevantes antes de experimentos em grande escala.
• Para ELISA, considere usar uma etapa de bloqueio com peptídeo fosforilado para garantir a especificidade para o epítopo fosforilado.

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