Anticorpo Policlonar de Coelho Anti-Fosfo-FLT3-Y589/591 para WB, ELISA - P36888

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do FLT3

• FLT3 (quinase 3 da tirosina semelhante a Fms), também designado FLK2, STK1 e CD135, é uma quinase proteica tirosina do tipo receptor que se liga ao FLT3LG para regular a diferenciação, proliferação e sobrevivência de células progenitoras hematopoiéticas e células dendríticas.
• A sinalização a jusante inclui a fosforilação de SHC1 e AKT1, ativação de MTOR, a cascata RAS/MAPK (MAPK1/ERK2, MAPK3/ERK1) e proteínas STAT5, embora o FLT3 selvagem induza apenas uma ativação marginal de STAT5.
• O FLT3 está localizado na membrana celular e dentro do lúmen do retículo endoplasmático.
• A expressão é detectada na medula óssea, células-tronco hematopoiéticas, células progenitoras mieloides e granulócitos/macrófagos; além disso, no fígado, timo, baço, linfonodo, rim e pâncreas, com níveis elevados na leucemia de células T.
• Mutações que causam atividade quinase constitutiva impulsionam a proliferação celular e a resistência à apoptose por meio de múltiplas vias, destacando o FLT3 como um proto-oncogene e uma variante chave da doença na leucemia mieloide aguda.
• Como glicoproteína e fosfoproteína, o FLT3 sofre splicing alternativo e está sujeito à conjugação de ubiquitina; ele também desempenha um papel nas interações hospedeiro-vírus.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Como este anticorpo tem como alvo sítios de fosforilação, use tampões de lise suplementados com inibidores de fosfatases para preservar o epítopo fosforilado durante a preparação de amostras para Western blot.
• Considere estimular células que expressam FLT3 (por exemplo, linhagens de leucemia) com ligante FLT3, ou tratar com inibidores de quinase, para confirmar a detecção específica de fosforilação.
• Para ELISA, o fosfopeptídeo imunogênico pode servir como controle positivo; as condições de revestimento da placa e detecção podem exigir otimização.
• Valide a especificidade do anticorpo comparando os sinais de lisados selvagens e tratados com fosfatase ou usando mutagênese direcionada ao sítio de Y589/Y591.

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