Anticorpo Policlonal Anti-Fosfo-FOXO3A (Ser294) para WB, ELISA - O43524

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da FOXO3A

• FOXO3A (forkhead box O3) é um fator de transcrição da família forkhead, codificado pelo gene FOXO3 (apelidos FKHRL1, FOXO2, AF6q21). Liga-se ao motivo de consenso de DNA 5'-[AG]TAAA[TC]A-3'.
• Desencadeia apoptose na ausência de fatores de sobrevivência, incluindo morte de células neuronais sob estresse oxidativo.
  Referências relacionadas: PMID:10102273, PMID:16751106
• FOXO3A participa na regulação pós-transcricional de MYC: a fosforilação por MAPKAPK5 promove a indução de miR-34b/c, que se liga à 3'UTR de MYC e inibe a tradução.
  Referências relacionadas: PMID:21329882
• Em resposta ao estresse metabólico, a FOXO3A transloca para as mitocôndrias e promove a transcrição do mtDNA.
  Referências relacionadas: PMID:23283301
• FOXO3A é um regulador chave da diferenciação de células T reguladoras (Treg) ao ativar a expressão de FOXP3.
  Referências relacionadas: PMID:30513302
• A proteína se desloca dinamicamente entre o citoplasma, o núcleo e os compartimentos mitocondriais (matriz/membrana externa) dependendo de fosforilação e sinais celulares.
• A atividade da FOXO3A é governada por múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação em resíduos Ser/Thr (ex.: Ser294), acetilação, metilação e ubiquitinação.
• É amplamente expressa em tecidos humanos (ubíqua).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético que abrange a Ser294 da FOXO3A humana. Este anticorpo é adequado para detectar FOXO3A fosforilada (Ser294) em aplicações de WB e ELISA. A reatividade cruzada de espécies é prevista para camundongo e rato devido à conservação da sequência, mas os níveis de expressão endógena podem variar; valide no sistema de amostra relevante.
• Para WB, considere que o peso proteico da FOXO3A é ~71 kDa; no entanto, a fosforilação pode induzir ligeiros deslocamentos de mobilidade. Use inibidores de fosfatase durante o preparo da amostra para preservar o sinal fosfo.
• Como a fosforilação da FOXO3A na Ser294 é um evento dinâmico influenciado por condições celulares (ex.: estresse oxidativo, sinalização de fatores de crescimento), inclua controles positivos e negativos apropriados (ex.: células estimuladas vs. células em repouso) em seus experimentos.

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