Anticorpo Monoclonal Anti-Fosfo-GSK3β-S9 para WB, ELISA - P49841

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do GSK3β

• O GSK3β funciona como uma cinase constitutivamente ativa que regula negativamente a síntese de glicogênio, a síntese de proteínas e a sinalização Wnt ao fosforilar substratos-chave como GYS1, EIF2B e CTNNB1/beta-catenina. Referências relacionadas: PMID:11430833, PMID:12554650, PMID:8397507

• Na via Wnt, o GSK3β forma um complexo de destruição com APC e AXIN1, fosforilando a beta-catenina para promover sua degradação dependente de ubiquitina, inibindo assim a expressão de genes alvo do Wnt. Referências relacionadas: PMID:12554650

• O GSK3β fosforila MAPT/TAU em Thr-548, reduzindo significativamente sua capacidade de estabilizar microtúbulos, e está envolvido na formação de emaranhados neurofibrilares na doença de Alzheimer. Referências relacionadas: PMID:14690523

• É um regulador chave do relógio circadiano, fosforilando e promovendo a degradação dos componentes centrais do relógio BMAL1, CLOCK e PER2. Referências relacionadas: PMID:19946213, PMID:28903391

• A proteína é predominantemente citoplasmática, mas também se localiza no núcleo e na membrana celular.

• O GSK3β é expresso em vários tecidos, incluindo testículo, timo, próstata, ovário e em níveis mais baixos no pulmão, cérebro e rim; colocaliza com PKR e TAU no cérebro na doença de Alzheimer.

• Além disso, o GSK3β fosforila JUN (reduzindo sua afinidade ao DNA), NFATC1 (promovendo a exportação nuclear) e regula a apoptose, a sinalização da insulina e o desenvolvimento neuronal. Referências relacionadas: PMID:1846781, PMID:9072970

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é um peptídeo fosforilado sintético circundante ao Ser9 do GSK3β humano. Para Western blotting, é aconselhável incluir inibidores de fosfatases durante a lise celular e verificar o peso molecular em aproximadamente 47 kDa.
• Para confirmar a especificidade fosfo, considere tratar os lisados celulares com λ-fosfatase antes da análise ou realizar ensaios de competição de peptídeo com o peptídeo fosfo e não fosfo.
• Para ELISA, certifique-se de que o antígeno revestido na placa preserve o epítopo fosfo; um tampão de revestimento suave e condições de bloqueio otimizadas são recomendados. Valide a linearidade do sinal e o fundo na matriz da amostra relevante.

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