Anticorpo Policloal de Coelho Anti-Fosfo-GYS1-S641 para WB, ELISA - P13807

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Glicogênio Sintase 1 (GYS1)

• GYS1 codifica a isoforma muscular da glicogênio sintase, uma enzima chave na biossíntese do glicogênio; o splicing alternativo gera múltiplas isoformas (palavra-chave: Splicing alternativo).
• A glicogênio sintase atua cooperativamente com a glicogenina e a enzima ramificante do glicogênio para alongar o primer de glicogênio, transferindo glicose da UDP-glicose para a extremidade não redutora das cadeias de alfa-1,4-glucano.
• A enzima é regulada alostericamente e sofre fosforilação em múltiplos sítios, incluindo Ser641, modulando sua atividade em resposta à insulina e sinais metabólicos (palavras-chave: Enzima alostérica, Fosfoproteína).
• Expressa predominantemente no músculo esquelético, GYS1 também é encontrada em outros tecidos que contêm glicogênio, desempenhando papel central no armazenamento de glicose e na homeostase energética.
• Mutações em GYS1 estão associadas a doenças de armazenamento de glicogênio e diabetes mellitus, destacando sua importância clínica (palavras-chave: Variante de doença, Diabetes mellitus).
• Como membro da família das glicosiltransferases, GYS1 catalisa a formação de ligações glicosídicas alfa-1,4, uma etapa crítica na síntese de glicogênio.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Como este anticorpo tem como alvo um sítio de fosforilação, certifique-se que GYS1 está fosforilado nas condições experimentais; inclua inibidores de fosfatase durante a preparação da amostra para preservar o sinal fosfo.
• Para WB, espera-se uma banda em aproximadamente 84 kDa; valide a especificidade ao fosfato tratando as amostras com lambda fosfatase ou usando um controle de bloqueio com peptídeo não fosforilado.
• Para ELISA, use o peptídeo fosforilado como controle positivo e o peptídeo não fosforilado correspondente para avaliar a especificidade de ligação.
• A reação cruzada está confirmada para humano, camundongo e rato; se usado em outras espécies, verifique a conservação da sequência flanqueadora de Ser641 por alinhamento.
• As diluições de trabalho ideais para WB e ELISA devem ser determinadas empiricamente; comece com a recomendação do fabricante e ajuste a titulação de acordo com o sistema de amostras.
• Use tampões de bloqueio sem fosfato para minimizar interações não específicas potenciais com epítopos fosfo.

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