Anti-Fosfo-HDAC2 (S394) Anticorpo Policlonal de Coelho para WB, IHC-P, ELISA - Q92769

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HDAC2

• O HDAC2 (Histona desacetilase 2) é uma enzima modificadora de cromatina que catalisa a desacetilação de resíduos de lisina nas histonas centrais (H2A, H2B, H3, H4), levando à repressão epigenética e ao silenciamento transcricional. Referências relacionadas: PMID:28497810

• Funciona dentro de grandes complexos multiproteicos, como NuRD, SIN3B e RCOR/GFI/KDM1A/HDAC, que recrutam a atividade HDAC para regiões genómicas específicas para regular a transcrição, a progressão do ciclo celular e o desenvolvimento. Referências relacionadas: PMID:12724404 PMID:16428440 PMID:28977666 PMID:37137925

• Para além das histonas, o HDAC2 desacetila alvos não-histónicos, como TSHZ3 e MTA1, modulando as suas atividades de repressor transcricional em genes como TFF1 e CDKN1A. Referências relacionadas: PMID:19343227 PMID:21965678

• O HDAC2 também atua como uma desacilase de proteína-lisina, removendo grupos crotonil, lactil e 2-hidroxisobutiril dos resíduos de lisina, expandindo a sua capacidade regulatória para além da acetilação. Referências relacionadas: PMID:28497810 PMID:29192674 PMID:35044827

• A proteína localiza-se tanto no núcleo como no citoplasma, consistente com papéis na modulação da cromatina e potenciais funções de sinalização citoplasmática.

• O HDAC2 é amplamente expresso nos tecidos, com níveis relativamente mais baixos observados no cérebro e no pulmão.

• A fosforilação na serina 394 representa uma modificação pós-traducional chave que pode regular a atividade, as interações ou a localização do HDAC2; modificações adicionais incluem acetilação, S-nitrosilação e ubiquitinação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Como um anticorpo específico para fosfo produzido contra um peptídeo circundante da Ser394, inclua controlos apropriados, como lisatos tratados com fosfatase ou bloqueio com não-fosfopeptídeo, para confirmar a especificidade do sinal.
• Para Western blotting, espera-se uma banda em torno de 55 kDa; use tampões de lise e de corrida protetores de fosfo e valide a deteção com amostras de controlo positivas e negativas.
• Em aplicações de IHC-P, otimize a fixação (por exemplo, PFA a 4%) e a recuperação de antigénio para preservar os epítopos fosforilados; valide a coloração com controlos de isótipo e inibição competitiva.
• Em ELISA, garanta uma revestimento eficiente do peptídeo alvo e avalie a reatividade cruzada com o peptídeo não fosforilado correspondente para verificar a especificidade para fosfo.

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