Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfo-HDAC4-S246 + HDAC5-S259 + HDAC9-S220 - P56524 / Q9UQL6 / Q9UKV0

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de HDAC4/5/9

• A histona desacetilase 4 (HDAC4) é uma histona desacetilase de classe II que catalisa a remoção de grupos acetila dos resíduos de lisina nas caixas N-terminais das histonas centrais (H2A, H2B, H3, H4), levando à compactação da cromatina e à repressão transcricional epigenética.
• A HDAC4 atua como um repressor transcricional através da formação de grandes complexos multiproteicos e está criticamente envolvida na progressão do ciclo celular e em eventos de desenvolvimento.
• Através da interação direta com os membros da família do fator de realce do miócito-2 (MEF2) (MEF2A, MEF2C, MEF2D), a HDAC4 desempenha um papel fundamental na maturação e diferenciação muscular.
• A HDAC4 participa na regulação epigenética mediada por MTA1 da expressão do receptor de estrogênio 1 (ESR1) no câncer de mama, ligando a atividade desacetilase à sinalização hormonal.
• A HDAC4 desacetila HSPA1A e HSPA1B em Lys-77, promovendo sua ligação preferencial ao co-chaperone STUB1 (PubMed:27708256). Referências relacionadas: PMID:27708256
• A proteína localiza-se tanto no núcleo quanto no citoplasma, deslocando-se em resposta a sinais de fosforilação; é expressa de forma onipresente nos tecidos.
• A HDAC4 está sujeita a extensas modificações pós-traducionais (fosforilação, ubiquitinação) e está associada a distúrbios do neurodesenvolvimento, incluindo epilepsia e deficiência intelectual.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfo-peptídeo sintético que abrange a S246 da HDAC4, a S259 da HDAC5 e a S220 da HDAC9; a especificidade do anticorpo para as formas fosforiladas deve ser confirmada pelo tratamento com fosfatase dos lisados.
• Para o Western blot, as frações nucleares e citoplasmáticas podem produzir bandas devido ao deslocamento da HDAC4; os pesos moleculares observados podem variar de 57–65 kDa (possivelmente clivado/isoforma) a 97–122 kDa (comprimento total). Valide com controles positivos e negativos.
• Em IHC-P, as condições de recuperação de antígeno podem precisar de otimização; considere incluir peptídeos de bloqueio específicos para fosfo para confirmar a coloração.
• Indica-se reatividade cruzada com HDAC4/5/9 de camundongo e rato; no entanto, o alinhamento de sequência dos locais de fosforilação alvo deve ser verificado se utilizado em outras espécies.

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