pAb de coelho Anti-Fosfo-Histona H2A-S129 - P04911

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H2A.1

• A Histona H2A.1 é um componente central do nucleossomo, a unidade fundamental de repetição da cromatina. Os nucleossomos enrolam e compactam o DNA, regulando assim a acessibilidade do DNA para transcrição, replicação, reparo e estabilidade cromossômica.
• Esta histona está criticamente envolvida na resposta ao dano do DNA, particularmente no reparo de quebras de dupla fita do DNA (DSBs) por meio das vias de recombinação homóloga e junção não homóloga de extremidades.
• Modificações pós-traducionais da Histona H2A.1, como a fosforilação na Ser129 (equivalente à H2AX S139 de mamíferos), acetilação, metilação e ubiquitinação, formam um código de histonas que modula a estrutura da cromatina e recruta proteínas de reparo aos locais de dano.
• A proteína está localizada exclusivamente no núcleo e está associada aos cromossomos durante todo o ciclo celular.
• A Histona H2A.1 de S. cerevisiae é codificada pelo gene HTA1 e pertence à família de histonas H2A, que inclui variantes altamente conservadas entre eucariotos.
• Palavras-chave associadas ao P04911 incluem dano de DNA, reparo de DNA, fosfoproteína, núcleo do nucleossomo e conjugação de Ubl, destacando seus papéis fundamentais na manutenção do genoma.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopeptídeo sintético correspondente à Ser129 fosforilada da Histona H2A de levedura. Portanto, o anticorpo reconhece especificamente a forma fosforilada; certifique-se de que as condições experimentais preservem o estado de fosforilação (por exemplo, use inibidores de fosfatase durante a preparação da amostra).
• Para IHC-P, os métodos de recuperação de antígeno e os protocolos de fixação de tecido devem ser otimizados para epítopos fosforilados. Considere testar anidrido citraconico ou recuperação de antígeno induzida por calor em tampão de citrato (pH 6,0) se os métodos padrão apresentarem coloração fraca.
• Em ELISA, o anticorpo pode ser usado para detecção de peptídeos ou proteínas H2A fosforiladas. Verifique a reatividade cruzada com o alvo endógeno nas espécies relevantes (humano, rato) incluindo controles apropriados e bloqueio com peptídeos não fosforilados.
• Embora o imunógeno seja derivado de levedura, a reatividade cruzada é relatada para humanos e ratos. No entanto, o alinhamento de sequência revela que a região ao redor da Ser129 é altamente conservada em eucariotos superiores; ainda assim, a validação no sistema de amostra específico é recomendada.

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