Anticorpo Monoclonal Anti-Fosfo-Histona H3-S10 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q16695 / P68431

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3.1t

• Codificada pelo gene H3-4 (também conhecido como H3FT, HIST3H3), a Histona H3.1t (também designada H3/g ou Histona H3.4) é uma variante específica de testículo da histona canônica H3.
• Como uma histona central, a H3.1t forma um octâmero com H2A, H2B e H4 para montar o nucleossomo, a unidade repetitiva fundamental da cromatina.
• Os nucleossomos envolvem e compactam o DNA, restringindo o acesso às proteínas de ligação ao DNA e, assim, desempenhando um papel central na regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossômica.
• A Histona H3.1t localiza-se no núcleo e está associada aos cromossomos, contribuindo para a arquitetura da cromatina.
• Esta histona está sujeita a uma complexa gama de modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação, metilação, citrulinização e ubiquitinação, que coletivamente formam o "código de histonas" que modula a estrutura e função da cromatina.
• A expressão tecidual é amplamente confinada às células testiculares, sugerindo um papel especializado na espermatogênese ou organização da cromatina em células germinativas masculinas.
• A proteína tem um peso molecular calculado de aproximadamente 15,5 kDa, consistente com o peso de detecção de 15 kDa do produto.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Como este anticorpo foi gerado contra um peptídeo fosforilado, é aconselhável incluir lisados celulares não tratados e tratados com fosfatase no "western blotting" para confirmar a detecção dependente de fosforilação.
• Para "western blotting", uma banda em aproximadamente 15 kDa corresponde ao peso molecular previsto da histona H3; certifique-se da desnaturação completa devido à natureza básica das histonas.
• Em imunofluorescência e imuno-histoquímica, espera-se coloração nuclear; o sinal pode intensificar-se em células mitóticas onde a fosforilação da histona H3 Ser10 é enriquecida.
• A reatividade cruzada é relatada com humano, camundongo e rato, e prevista com uma ampla gama de espécies; não obstante, recomenda-se validar o anticorpo no organismo modelo específico antes de ensaios quantitativos.
• O anticorpo pode ser usado para detecção baseada em ELISA de peptídeos de histona H3 fosforilados; considere o uso de peptídeos fosforilados e não fosforilados como controles.

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