Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfo-Histona H3-S28 para WB, IP, ELISA - Q16695 / P68431

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3 (Fosfo-S28)

• A Histona H3 é um componente central do nucleossomo, a unidade básica da cromatina, e desempenha um papel fundamental na compactação do DNA e na regulação da acessibilidade do DNA.
• Existem múltiplas variantes de H3; Q16695 codifica a Histona H3.1t específica de testículo (também conhecida como H3/g, H3.4), mas o produto pode reconhecer outras variantes de H3, incluindo H3.1 (P68431), devido à alta conservação da sequência.
• Como parte do nucleossomo, a H3 contribui para processos nucleares essenciais, como regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossômica.
• A Histona H3 está sujeita a um complexo conjunto de modificações pós-traducionais (MPTs), coletivamente denominadas código de histonas, que modulam a estrutura e função da cromatina. As principais MPTs incluem acetilação, metilação, fosforilação, ubiquitinação e outras.
• A fosforilação na Serina 28 (S28) faz parte do código de histonas e está implicada na dinâmica da cromatina, influenciando a mitose e a ativação gênica.
• A localização subcelular é restrita ao núcleo e associada aos cromossomos, consistente com seu papel ligado à cromatina.
• A H3.1t mostra expressão tecido-específica em células testiculares, sugerindo funções especializadas na espermatogênese ou remodelação da cromatina durante o desenvolvimento das células germinativas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi produzido contra um peptídeo fosforilado sintético em torno da S28; portanto, espera-se que detecte especificamente a forma fosforilada da Histona H3. Para preservar a fosforilação durante o preparo da amostra, inclua inibidores de fosfatase nos tampões de lise.
• Para western blotting (WB), o peso molecular previsto é ~15 kDa, e uma banda nítida deve ser observada. Considere usar extratos nucleares ou histonas extraídas com ácido para detecção enriquecida.
• Na imunoprecipitação (IP), o formato monoclonal de coelho proporciona alta afinidade e especificidade; valide as condições de ligação e eluição empiricamente em sua amostra alvo.
• Para ELISA, o peptídeo fosforilado pode ser usado como controle positivo; otimize as condições de revestimento e detecção para minimizar a reatividade cruzada com peptídeos não fosforilados.
• A reatividade cruzada é prevista para uma ampla gama de espécies com base na conservação da sequência; no entanto, sempre verifique com controles específicos para a espécie apropriados.

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