Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Fosfo-Histona H3-T45 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q16695 / P68431

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Fosforilação da Histona H3 em Thr45

• A Histona H3 é um componente central da histona do nucleossomo, essencial para a compactação do DNA em cromatina. Desempenha papéis fundamentais na regulação da transcrição, reparação do DNA, replicação e estabilidade cromossómica, com a acessibilidade do DNA modulada por modificações pós-traducionais (código da histona).
• Este produto reconhece a H3 fosforilada em Thr45 (T45); o alvo inclui a isoforma específica do testículo Histona H3.1t (H3/g, H3.4) codificada pelo gene H3-4, e as isoformas canónicas da Histona H3.1 dependentes da replicação.
• A família de genes H3 compreende numerosos genes sem intrões que codificam proteínas H3 idênticas ou altamente semelhantes, sendo a variante central H3.1 a mais abundante. O local de fosforilação Thr45 é conservado entre as isoformas de H3.
• Subcelularmente, a H3 localiza-se no núcleo e associa-se aos cromossomas, consistente com o seu papel na arquitetura da cromatina ao longo do ciclo celular.
• A H3 sofre numerosas modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, metilação, fosforilação, citrulinação e ubiquitinação, que estabelecem coletivamente estados de cromatina distintos. A fosforilação em Thr45 está implicada em eventos de remodelação da cromatina.
• A expressão específica do tecido da H3.1t é enriquecida em células testiculares, mas devido à alta homologia de sequência, este anticorpo fosfo-específico também deteta a H3.1 e outras proteínas H3 canónicas numa ampla gama de espécies e tecidos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio é um peptídeo fosforilado sintético em torno do Thr45; para uma fosfo-especificidade ideal, considere validar com ensaios de competição com peptídeo não fosforilado ou tratamento com fosfatase em sistemas de amostras.
• Para Western blot (WB), imunoprecipitação (IP), imunofluorescência (IF/ICC) e imuno-histoquímica (IHC-P), as diluições devem ser otimizadas para cada ensaio e tipo de tecido.
• Dada a conservação do local de fosforilação T45, prevê-se reatividade cruzada com outras espécies. Verifique a deteção na sua espécie de interesse e inclua controlos positivos apropriados (por exemplo, lisados de células mitóticas para fosforilação).
• Para aplicações de ELISA, garanta um revestimento adequado do peptídeo para preservar o reconhecimento do fosfo-epítopo.

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