Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfo-Histona H3.3-T3 para WB, ELISA - Q16695 / P68431

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3.1t

• A histona H3.1t (também designada H3/g ou H3.4) é um componente central do nucleossomo, enrolando e compactando o DNA em cromatina, restringindo assim a acessibilidade do DNA à maquinaria celular essencial para processos como transcrição, replicação e reparo.
• Os nucleossomos desempenham um papel central na regulação da transcrição, reparo de DNA, replicação de DNA e estabilidade cromossômica, modulando a acessibilidade do DNA através de um conjunto complexo de modificações pós-traducionais, conhecidas coletivamente como código de histonas, e remodelagem de nucleossomos.
• A H3.1t é um membro da família de histonas H3 e é expressa especificamente em células testiculares, sugerindo uma função especializada na organização da cromatina durante a espermatogênese.
• A proteína localiza-se exclusivamente no núcleo e nos cromossomos, onde contribui para a manutenção estrutural e regulação dinâmica da cromatina.
• A histona H3.1t está sujeita a inúmeras modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, metilação, fosforilação, citrulinização, ADP-ribosilação, hidroxilação e ubiquitinação, que juntas orquestram a dinâmica da cromatina e o controle epigenético.
• As palavras-chave do UniProt destacam seu envolvimento na formação do núcleo do nucleossomo, ligação ao DNA e uma ampla gama de modificações, sublinhando seu papel fundamental na regulação epigenética e estabilidade do genoma.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético fosforilado que abrange o sítio de fosforilação T3 da histona H3.3 humana (UniProt P84243); prevê-se ampla reatividade cruzada com outras variantes de H3 com base na homologia de sequência.
• Para western blotting, empregue inibidores de fosfatases durante a lise e preparação da amostra para preservar o epítopo fosfo-Thr3. A banda migratória esperada corresponde a ~15 kDa.
• Para confirmar a especificidade do anticorpo, considere ensaios de competição de peptídeos com peptídeos fosforilados versus não fosforilados ou tratamento das amostras com fosfatase de proteína lambda antes da detecção.
• Em aplicações de ELISA, otimize as condições de revestimento para o antígeno fosforilado e inclua controles rigorosos para ligação inespecífica e efeitos de matriz.

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