Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Fosfo-HSF1-S307 para WB, ELISA - Q00613

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do HSF1

• O fator de choque térmico 1 (HSF1) é um fator de transcrição indutível por estresse que desempenha um papel central na resposta ao choque térmico, ativando a expressão de chaperonas moleculares (HSPs) que protegem as células de danos. Referências relacionadas: PMID:11447121, PMID:12659875, PMID:12917326
• Em células não estressadas, o HSF1 é mantido num estado monomérico inativo através da interação com um complexo multichaperona contendo HSP90. Referências relacionadas: PMID:11583998, PMID:16278218, PMID:9727490
• Após estresse, o HSF1 homotrimeriza e liga-se aos elementos de choque térmico (HSEs) nos promotores dos genes HSP para iniciar a transcrição. Referências relacionadas: PMID:10359787, PMID:11583998, PMID:12659875
• A fosforilação em Ser307 é uma modificação reguladora chave que modula a atividade transcricional do HSF1 e o atenuação da resposta ao estresse.
• O HSF1 também regula o processamento de pré-mRNA, a exportação nuclear de mRNA de HSP70 e desempenha funções na mitose, reparação de DNA e proliferação celular. Referências relacionadas: PMID:14707147, PMID:17897941, PMID:18794143, PMID:26359349, PMID:26754925
• A localização subcelular é dinâmica: o HSF1 é encontrado no núcleo, citoplasma, centrossomo e cinetocoro, dependendo do estado celular.
• O HSF1 está envolvido na reativação do HIV-1 latente através da ligação ao promotor LTR viral e do recrutamento de fatores de alongamento transcricional.
• O HSF1 sofre múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação e ubiquitinação, que regulam a sua atividade.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Como este anticorpo visa o local de fosforilação Ser307, verifique a especificidade fosfo-específica por ensaio de competição de peptídeos ou tratando células com inibidores de fosfatases.
• Para WB, espera-se uma banda em aproximadamente 57 kDa. Use lisados de células humanas submetidas a choque térmico (por exemplo, HeLa ou Jurkat) como controlos positivos; inclua controlos não tratados para confirmar a fosforilação induzível por estresse.
• ELISA: adequado para detectar fosfo-HSF1-S307 em amostras humanas. Considere usar um anticorpo de captura contra o HSF1 total e detectar com este anticorpo fosfo-específico para ELISA sanduíche.
• Os diluentes e tampões de bloqueio devem ser otimizados empiricamente; a BSA é geralmente preferível em relação ao leite para anticorpos fosfo-específicos.

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