Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Fosfo-HSL-S563 para WB, ELISA - Q05469

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Lipase Sensível a Hormônios

• A lipase sensível a hormônios (HSL), codificada pelo gene LIPE, é uma lipase multifuncional com ampla especificidade de substrato, hidrolisando triacilgliceróis, diacilgliceróis, monoacilgliceróis, ésteres de colesterol e ésteres de retinila (PubMed:15716583, PubMed:15955102, PubMed:19800417).
  Referências relacionadas:
  PMID:15716583
  PMID:15955102
  PMID:19800417

• A HSL hidrolisa preferencialmente diacilgliceróis em relação a triacilgliceróis e monoacilgliceróis, com preferência pela posição sn-3 da espinha de glicerol nos diacilgliceróis.

• No tecido adiposo e no coração, a HSL mobiliza principalmente triglicerídeos armazenados em ácidos graxos livres para energia, enquanto nos tecidos esteroidogênicos, converte ésteres de colesterol em colesterol livre para a produção de hormônios esteroides.

• A HSL também catalisa a hidrólise do 2-aracidonoilglicerol, um endocanabinoide, e do 2-acetil monoalquilglicerol éter, um precursor na síntese do fator de ativação de plaquetas.

• A nível subcelular, a HSL localiza-se no citosol, gotículas lipídicas e na membrana celular, incluindo caveolas; a sua translocação é regulada por fosforilação.

• A HSL é uma fosfoproteína, e a sua atividade e localização intracelular são moduladas pela fosforilação em múltiplos resíduos; este anticorpo deteta especificamente a HSL fosforilada na serina 563.

• A proteína é altamente expressa no testículo, mas também está presente no tecido adiposo, coração e tecidos esteroidogênicos, refletindo os seus papéis-chave na homeostase energética e esteroidogênese.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético correspondente à Ser563 do HSL de rato; verifique o alinhamento da sequência com o HSL humano, de camundongo e rato para garantir a reatividade cruzada.

• Para Western blotting, o peso molecular previsto da HSL é de aproximadamente 117 kDa; considere usar uma percentagem de gel apropriada e condições de transferência para proteínas de alto peso molecular.

• Valide a especificidade do anticorpo tratando as amostras com fosfatase ou usando controlos de peptídeo não fosforilado.

• Para ELISA, otimize as condições de revestimento e inclua um padrão de peptídeo fosforilado para quantificar os níveis de fosforilação.

• Use condições de estímulo apropriadas (por exemplo, isoproterenol para adipócitos) para induzir a fosforilação da HSL na Ser563 antes da deteção.

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