Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfo-HSL-S853 para WB - Q05469

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Lipase Sensível a Hormônios

• A lipase sensível a hormônios (HSL) é uma lipase de ampla especificidade que catalisa a hidrólise de triacilgliceróis (TAGs), diacilgliceróis (DAGs), monoacilgliceróis (MAGs), ésteres de colesterol e ésteres de retinila. Ela apresenta hidrólise preferencial de DAGs em relação a TAGs e MAGs, e cliva preferencialmente ésteres de ácidos graxos na posição sn-3 dos DAGs (PubMed:15716583, PubMed:15955102, PubMed:19800417). Referências relacionadas: PMID:15716583 PMID:15955102 PMID:19800417
• No tecido adiposo e no coração, a HSL hidrolisa principalmente triglicerídeos armazenados para liberar ácidos graxos livres, enquanto em tecidos esteroidogênicos, ela converte ésteres de colesterol em colesterol livre para a produção de hormônios esteroides.
• A proteína, codificada pelo gene LIPE, também é conhecida como monoacilglicerol lipase LIPE, retinil éster hidrolase (REH), e está implicada em distúrbios metabólicos como diabetes e obesidade.
• A HSL se localiza em múltiplos compartimentos celulares, incluindo membrana celular, caveolas, citosol e gotículas lipídicas, o que é consistente com seu papel na mobilização de lipídios.
• A fosforilação na serina 853 (S853) é uma modificação regulatória chave que modula a atividade enzimática e a localização subcelular da HSL; a proteína é classificada como uma fosfoproteína envolvida na degradação de lipídios e no metabolismo de colesterol/esteroides.
• A expressão tecidual é mais alta no testículo, com presença adicional no tecido adiposo, coração e tecidos esteroidogênicos, refletindo suas funções metabólicas específicas por tecido.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este anticorpo é produzido contra um fosfopeptídeo sintético correspondente à serina 853 fosforilada da HSL humana; ele reconhece especificamente a forma fosforilada da HSL e não deve detectar a proteína não fosforilada.
• Para Western blotting, utilize tampões de lise contendo inibidores de fosfatases para preservar o sinal de fosforilação. A HSL migra a aproximadamente 117 kDa; otimize a diluição do anticorpo de acordo com o tipo de amostra e o sistema de detecção utilizado.
• A reatividade cruzada com camundongo está confirmada; portanto, o anticorpo pode ser usado para lysados de tecidos ou células de camundongo. Valide a especificidade no seu contexto biológico relevante, como tecidos lipolíticos ou esteroidogênicos.
• Para ELISA, considere o uso de uma estratégia de recobrimento ou detecção fosfo-específica; verifique a linearidade e a sensibilidade com padrões conhecidos de HSL fosforilada ou ensaios de competição com peptídeos.

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