Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Fosfo-Receptor de IGF-I β (Tyr1135/1136) / Receptor de Insulina β (Tyr1150/1151) para WB e ELISA - P06213/P08069

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Receptor de Insulina (INSR) / Receptor de IGF-I (IGF1R)

• O receptor de insulina (INSR) é uma tirosina quinase de receptor que media as ações pleiotrópicas da insulina, incluindo a regulação metabólica, o crescimento celular e a diferenciação.
• Após a ligação da insulina, o INSR fosforila substratos intracelulares como IRS1, SHC e CBL, levando à ativação de duas principais vias de sinalização: a via PI3K-AKT/PKB (responsável pelas ações metabólicas) e a via Ras-MAPK (regulando o crescimento e a diferenciação celular).
• O INSR pode formar receptores híbridos com o IGF1R; estes híbridos ligam-se ao IGF1 com alta afinidade, enquanto a sua sensibilidade à insulina varia dependendo da composição das isoformas. Referências relacionadas: PMID:12138094 PMID:16831875
• O INSR localiza-se na membrana celular e, após a ativação, pode ser internalizado para endossomas tardios e lisossomas para atenuação da sinalização ou degradação.
• Duas principais isoformas (Longa e Curta) são predominantemente expressas em tecidos alvo da insulina (fígado, tecido adiposo, músculo esquelético), com a Curta também expressa em células fetais; o INSR está superexpresso em vários tumores, incluindo carcinomas da mama, cólon e pulmão.
• As principais modificações pós-traducionais incluem a fosforilação de tirosina, essencial para a atividade da quinase, bem como a glicosilação, a formação de ligações dissulfeto e a ubiquitinação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio é um fosfopeptídeo sintético correspondente aos locais de fosforilação do loop de ativação; considere verificar a especificidade fosfo-específica tratando as amostras com λ-fosfatase antes do Western blotting.
• Para Western blot, recomendam-se lisados celulares estimulados por insulina (por exemplo, adipócitos HepG2, 3T3-L1) para induzir a fosforilação nos locais alvo; espera-se uma banda em torno de 156 kDa para a subunidade β.
• Em ELISA, o anticorpo pode ser utilizado para capturar ou detetar recetores fosforilados; aconselha-se a otimização das condições de revestimento e deteção.
• A reatividade reportada é contra humano; a reatividade cruzada com outras espécies é possível, mas deve ser validada experimentalmente se necessário.

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