Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfo-IκBα (Ser32) para WB, ELISA - P25963

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da IκBα

• O inibidor alfa de NF-κB (IκBα) é um regulador chave dos fatores de transcrição NF-κB, codificado pelo gene NFKBIA. Também é conhecido como I-kappa-B-alfa, IkB-alfa e MAD3.
• A IκBα funciona ligando-se a dímeros de NF-κB (como RELA/p65 e NFKB1/p50) no citoplasma, mascarando seus sinais de localização nuclear e impedindo a translocação nuclear. Referências relacionadas: PMID:1493333, PMID:36651806, PMID:7479976
• Após estímulo pró-inflamatório ou imune, a IκBα sofre fosforilação nos resíduos de serina 32 e 36, levando à ubiquitinação e degradação proteossomal, liberando o NF-κB para translocar para o núcleo e ativar a transcrição. Referências relacionadas: PMID:7479976, PMID:7628694, PMID:7796813
• A IκBα localiza-se predominantemente no citoplasma, mas pode se deslocar para o núcleo, onde também pode inibir a ligação do NF-κB ao DNA ou mediar o término da resposta do NF-κB.
• A fosforilação em Ser32 é um evento crítico na via canônica de sinalização NF-κB, tornando-a um biomarcador amplamente estudado para a ativação da via.
• Palavras-chave do UniProt indicam que a IκBα é uma fosfoproteína, sofre ubiquitinação e está envolvida em interações hospedeiro-vírus, destacando seu papel central na sinalização imune e em doenças.
• A proteína tem um peso molecular de aproximadamente 35,6 kDa (calculado) e contém domínios de repetição anquirina que mediam interações com o NF-κB.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopeptídeo sintético em torno de Ser32 da IκBα humana; portanto, o anticorpo reconhece especificamente a forma fosforilada. Sempre inclua inibidores de fosfatase durante o preparo da amostra para Western blot para preservar o sinal de fosforilação.
• Para aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção para quantificar fosfo-IκBα em lisados celulares ou de tecidos; considere emparelhá-lo com um anticorpo de IκBα total para normalização.
• Confirme a especificidade do anticorpo em seu sistema tratando amostras com fosfatase lambda ou usando um peptídeo não fosforilado como competidor.
• A reatividade cruzada é relatada para humano, camundongo e rato. Valide as reatividades nas espécies relevantes antes de experimentos em larga escala, pois a conservação do epítopo pode variar.

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