Anticorpo Policlonico de Coelho Anti-Fosfo-IKKα-S180 para WB, ELISA - O15111

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do IKKα

• IKKα (CHUK) é uma serina/treonina quinase que atua como subunidade catalítica do complexo IKK na via canônica de NF-kappa-B, fosforilando inibidores IκB para desencadear sua degradação e a ativação de NF-kappa-B (PubMed:18626576, PubMed:9244310, PubMed:9252186).

• Na via não canônica de NF-kappa-B, os homodímeros de IKKα fosforilam NFKB2/p100, levando ao seu processamento em p52 e à formação de complexos RelB-p52 essenciais para a sobrevivência de células B e a organogênese linfoide (PubMed:20501937).

• IKKα exerce retroalimentação negativa sobre a sinalização de NF-kappa-B ao fosforilar TAX1BP1, facilitando a montagem do complexo de edição de ubiquitina A20 que limita a ativação de genes inflamatórios (PubMed:21765415).

• No núcleo, IKKα fosforila a histona H3 na Ser10, promovendo a acetilação subsequente por CREBBP e modulando a acessibilidade da cromatina em promotores responsivos a NF-kappa-B (PubMed:12789342). Ele também fosforila o próprio CREBBP para aumentar suas atividades transcripcionais e de histona acetiltransferase (PubMed:17434128).

• IKKα é amplamente expresso e se localiza tanto no citoplasma quanto no núcleo, o que é consistente com seus papéis duplos na transdução de sinal e na regulação gênica nuclear.

• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação (chave para a ativação da quinase) e acetilação, sendo a proteína uma fosfoproteína conhecida.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi gerado usando um fosfopeptídeo sintético ao redor do sítio de fosforilação Ser180 do IKKα humano. Ele é projetado para reconhecer a forma fosforilada; confirme a especificidade usando tratamento com fosfatase ou competição com não fosfopeptídeo no seu ensaio.

• Para Western blot, considere carregar controles positivos adequados (por exemplo, células estimuladas com TNF-α ou IL-1β) ao lado de amostras não tratadas, e use inibidores de fosfatase durante a lise para preservar a fosforilação.

• As aplicações recomendadas são Western blot e ELISA com base nas especificações do fornecedor; as diluições ótimas devem ser determinadas experimentalmente no seu sistema de amostras.

• A reatividade cruzada é indicada para humano e camundongo; para outras espécies, valide com base na homologia de sequência da região do imunógeno.

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