Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Fosfo-INSR-Y1150/IGF1R-Y1135 para WB, ELISA - P06213 / P08069

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de INSR e IGF1R

• INSR é uma receptor tirosina quinase que medeia os efeitos metabólicos pleiotrópicos e promotores de crescimento da insulina através da ativação das cascatas de sinalização PI3K-AKT e Ras-MAPK.
• A fosforilação induzida por insulina das proteínas IRS leva à ativação da via PI3K-AKT, promovendo a translocação do transportador de glicose, anti-apoptose e regulação de enzimas gliconeogênicas/lipogênicas.
• A via Ras-MAPK, desencadeada via recrutamento de GRB2/SOS para IRS1 fosforilado, controla o crescimento, sobrevivência e diferenciação celular.
• INSR também se liga a IGF1 e IGF2 e pode formar receptores híbridos com IGF1R; esses receptores híbridos exibem afinidades de ligante distintas dependendo da composição do isoforma.
  Referências relacionadas: PMID:12138094 PMID:16831875
• INSR é predominantemente expresso em tecidos-alvo da insulina (fígado, adiposo, músculo esquelético) e é superexpresso em carcinomas de mama, cólon, pulmão, ovário e tireoide.
• A localização subcelular abrange a membrana celular, endossomos tardios e lisossomos, com o tráfego do receptor modulando a duração e especificidade do sinal.
• O anticorpo detecta especificamente a fosforilação em Y1150 (INSR) e Y1135 (IGF1R) dentro do loop de ativação da quinase, uma modificação essencial para a atividade total da quinase do receptor.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético em torno de Y1150 do INSR/IGF1R humano; este projeto visa especificamente o sítio de fosforilação do loop de ativação.
• Para Western blotting, considere usar lisados celulares totais de linhagens celulares humanas, de camundongo ou rato estimuladas por insulina; espere uma banda próxima a 154–156 kDa.
• Em aplicações de ELISA, use um peptídeo fosforilado como antígeno de revestimento e inclua um controle de peptídeo não fosforilado para verificar a especificidade para fosfo.
• Inclua inibidores de fosfatase durante o preparo da amostra e otimize as condições de estimulação celular para preservar os sinais de fosforilação.

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