Anticorpo monoclonal de coelho Anti-Phospho-IRF3-S396 para WB, IF/ICC, ELISA - Q14653

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do IRF3

• O fator regulador de interferão 3 (IRF3) é um regulador transcripcional chave das respostas imunes dependentes de interferão (IFN) de tipo I, essencial para a defesa inata contra vírus de DNA e RNA.
• Após infecção viral ou sinalização via receptor do tipo toll (TLR), o IRF3 é fosforilado pelas quinases IKBKE e TBK1, promovendo a dimerização, translocação nuclear e associação com CREBBP para formar o complexo fator 1 ativado por dsRNA (DRAF1), que ativa a transcrição de IFN-alfa/beta e de ISGs.
  Referências relacionadas:
  PMID:22394562
  PMID:25636800
  PMID:27302953
  PMID:16154084
  PMID:33440148
• Ele se liga aos elementos de resposta estimulados por interferão (ISRE) nos promotores genéticos, atuando como um ativador mais potente do IFNB do que do IFNA e contribuindo para as fases inicial e tardia da indução de IFN.
  Referências relacionadas:
  PMID:11846977
  PMID:16846591
  PMID:16979567
  PMID:20049431
• Em resposta à infecção pelo vírus Sendai, o IRF3 é recrutado para as mitocôndrias via TOMM70:HSP90AA1, onde desencadeia a apoptose através da ativação de BAX em macrófagos primários.
  Referências relacionadas:
  PMID:25609812
• IRF3 é um mediador crucial da resposta ao IFN durante a infecção por SARS-CoV-2, destacando seu papel na defesa antiviral contra patógenos emergentes.
  Referências relacionadas:
  PMID:33440148
• Subcelularmente, o IRF3 se localiza predominantemente no citoplasma em seu estado inativo, transloca para o núcleo após ativação e também se associa às mitocôndrias para regular a apoptose.
• Ele é expresso constitutivamente em uma ampla variedade de tecidos, reforçando seu papel basal na vigilância imune inata.
• A proteína sofre múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação e ubiquitinação, que controlam rigidamente sua atividade e estabilidade.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, espera-se uma banda de aproximadamente 47kDa. Valide a fosforo-especificidade tratando as amostras com lambda fosfatase ou usando um controle de bloqueio com peptídeo não fosforilado.
• Em experimentos de IF/ICC, estímulos como poli(I:C) ou infecção viral podem ser usados para induzir a translocação nuclear do IRF3, aumentando a detecção da forma fosforilada.
• O anticorpo apresenta reatividade cruzada com o IRF3 de camundongo; portanto, considere o uso de linhas celulares derivadas de camundongo ou células primárias tratadas com agonistas de TLR adequados para estudos funcionais.
• Para ELISA, otimize as concentrações do antígeno de revestimento e as diluições do anticorpo secundário para garantir a especificidade contra o epítopo S396 fosforilado.

CamelBio: Sua Ponte de Abastecimento Integral

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