Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfo-IRF3 (Ser386) para WB, ELISA - Q14653

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do IRF3

• O IRF3 é um regulador transcricional chave das respostas imunes dependentes de interferão do tipo I (IFN), essencial para a defesa imune inata contra vírus de ADN e ARN. Referências relacionadas: PMID:22394562 PMID:24049179 PMID:25636800
• Liga-se a elementos de resposta estimulados por interferão (ISRE) nos promotores dos genes de IFN do tipo I (IFN-alfa e IFN-beta) e genes estimulados por IFN (ISGs) para ativar a sua transcrição. Referências relacionadas: PMID:11846977 PMID:16846591 PMID:16979567
• Atua como um ativador mais potente do IFN-beta do que o IFN-alfa e é crítico tanto nas fases iniciais como tardias da indução dos genes IFNA/B. Referências relacionadas: PMID:16846591 PMID:16979567 PMID:20049431
• Em células não infetadas, o IRF3 reside no citoplasma numa forma inativa. Após infeção viral, ARNds, ou sinalização TLR, é fosforilado pelas cinases IKBKE e TBK1, o que induz mudança conformacional, dimerização e translocação nuclear. No núcleo, associa-se ao CREBBP para formar o complexo DRAF1, ativando a transcrição de genes alvo. Referências relacionadas: PMID:22394562 PMID:25636800 PMID:27302953 PMID:16154084 PMID:33440148
• O IRF3 pode impulsionar programas distintos de expressão génica em macrófagos e induzir apoptose em macrófagos primários. Referências relacionadas: PMID:16846591
• Em resposta à infeção pelo vírus Sendai, o IRF3 é recrutado para a mitocôndria por TOMM70:HSP90AA1, formando um complexo de apoptose com BAX. Referências relacionadas: PMID:25609812
• Também funciona como um fator de transcrição chave durante a infeção por SARS-CoV-2, regulando a resposta ao IFN. Referências relacionadas: PMID:33440148

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Uma vez que este anticorpo reconhece o fosfo-Ser386, inclua inibidores de fosfatases nos tampões de lise e considere o tratamento das amostras com fosfatase como um controlo negativo para confirmar a especificidade.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto do IRF3 é de 47 kDa; as bandas específicas de fosforilação podem ser fracas devido à baixa fosforilação basal, pelo que deve otimizar os tempos de exposição.
• Em aplicações ELISA, certifique-se de que o antigénio de revestimento está fosforilado em Ser386 para manter o reconhecimento do epítopo.

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