Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-JAK2 Fosforilado (Y1007/1008) para WB, IHC-P, ELISA - O60674

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da JAK2

• A tirosina-proteína quinase JAK2 (Janus quinase 2) é uma proteína tirosina quinase não receptor que desempenha um papel central na sinalização de receptores de citocinas.
• Ela fosforila receptores de tipo I (como GHR, PRLR, EPOR) e receptores de tipo II (como receptores de IFN), criando sítios de ligação a fosforotirosina para moléculas de sinalização a jusante (PMID:15690087, PMID:15899890, PMID:7615558). Referências relacionadas: PMID:15690087 PMID:15899890 PMID:7615558
• Após a ligação do ligante, a JAK2 também fosforila proteínas STAT (por exemplo, STAT5, STAT3) quando elas são recrutadas para o receptor, levando à sua dimerização e translocação nuclear para ativar a transcrição gênica (PMID:15690087, PMID:9618263). Referências relacionadas: PMID:15690087 PMID:9618263
• Na eritropoiese, a estimulação pela eritropoietina (EPO) desencadeia a autofosforilação da JAK2, sua associação com o EPOR e o subsequente recrutamento e fosforilação da STAT5, que impulsiona a transcrição de genes essenciais para o desenvolvimento de glóbulos vermelhos (PMID:9657743). Referências relacionadas: PMID:9657743
• A JAK2 media a regulação da cromatina ao fosforilar diretamente a tirosina 41 da histona H3 (H3Y41ph), uma modificação que exclui a proteína da heterocromatina HP1α (CBX5) da cromatina, modulando assim a expressão gênica (PMID:19783980). Referências relacionadas: PMID:19783980
• A JAK2 é expressa de forma ubíqua na maioria dos tecidos, o que suporta seus papéis pleiotrópicos no crescimento, desenvolvimento e imunidade.
• Subcelularmente, a JAK2 se localiza no citoplasma, núcleo e sistema de endomembranas, permitindo tanto a sinalização próxima à membrana quanto ações nucleares diretas.
• Ela é classificada como tirosina-proteína quinase, fosfoproteína e proto-oncogênio, possui domínio SH2 e está implicada na imunidade inata e adaptativa, rearranjos cromossômicos e doenças.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno para este anticorpo é um fosfopeptídeo sintético que abrange os resíduos Y1007 e Y1008 da JAK2 humana, que são críticos para a ativação da quinase. Este anticorpo é projetado para detectar apenas a forma fosforilada (ativa) da JAK2.
• No Western blotting, é esperada uma banda específica em ~131 kDa. Para confirmar a fosfoespecificidade, considere tratar as amostras com lambda fosfatase ou usar inibidores de quinase JAK2 como controles.
• Para IHC-P, resultados ótimos podem exigir recuperação de antígeno e titulação do anticorpo primário; inclua tecidos controle positivo e negativo com atividade conhecida de sinalização da JAK2.
• No ELISA, este anticorpo pode servir como componente de detecção quando pareado com um anticorpo de captura que reconhece a JAK2 total ou um epítopo distinto.
• Dados os amplos papéis da JAK2 na sinalização por citocinas, considere validar o anticorpo no seu sistema experimental específico, pois o status de ativação pode variar conforme o tipo celular e o tratamento.

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