Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfo-JNK1-T183/Y185 + JNK2-T183/Y185 + JNK3-T221/Y223 para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P45983/P45984/P53779

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de JNK1/2/3

• Membro da família das proteínas quinases ativadas por mitógenos (MAPK), também conhecidas como proteínas quinases ativadas por estresse (SAPK), incluindo JNK1 (MAPK8), JNK2 (MAPK9) e JNK3 (MAPK10).
• Ativado por dupla fosforilação em um motivo Thr-Pro-Tyr (T183/Y185 em JNK1) pelas quinases a montante MAP2K4/MKK4 e MAP2K7/MKK7 em resposta a estímulos de estresse.
• Fosforila e regula fatores de transcrição, notadamente c-Jun, ATF2 e ELK1, modulando assim a atividade transcricional de AP-1. Referências relacionadas: PMID:18307971
• Envolvido na proliferação, diferenciação, apoptose e autofagia celular, visando proteínas-chave como p53/TP53, BAD, BCL2 e BECN1. Referências relacionadas: PMID:21364637 PMID:21095239 PMID:18570871
• A localização subcelular inclui citoplasma, núcleo e sinapses; a translocação para o núcleo ocorre após a ativação.
• Contribui para a sinalização inflamatória através da fosforilação de NLRP3, promovendo a montagem do inflamassoma. Referências relacionadas: PMID:28943315
• Regula o ritmo circadiano através da fosforilação do heterodímero CLOCK-BMAL1. Referências relacionadas: PMID:22441692
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas (por exemplo, JNK1 alfa e beta) com preferências distintas de ligação a substratos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Como este anticorpo reconhece epítopos dependentes de fosforilação, trate as amostras com inibidores de fosfatases durante a lise e as evite armazenar por muito tempo em temperatura ambiente para preservar os sinais de fosfo.
• Para Western blotting, espere bandas em aproximadamente 48-52 kDa correspondentes a JNK1/2; bandas adicionais para JNK3 podem ser observadas em pesos moleculares semelhantes; use controles positivos como células tratadas com UV ou anisomicina.
• Para imunoprecipitação (IF-P), as etapas de permeabilização e bloqueio são críticas; valide a coloração em linhagens celulares relevantes estimuladas por estresse.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), considere a recuperação de antígeno com tampão citrato (pH 6,0) e teste diluições do anticorpo em tecidos conhecidos por exibir ativação de JNK, como aqueles sob condições inflamatórias ou apoptóticas.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; a reatividade cruzada com proteínas JNK não fosforiladas deve ser avaliada usando ensaios de competição com peptídeos apropriados.

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