Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfo-JNK1/2/3 (r183/r183/r221) para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P45983 / P45984 / P53779

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de JNK1/JNK2/JNK3

• A proteína quinase 8 ativada por mitógeno (MAPK8/JNK1) é uma serina/treonina-proteína quinase pertencente à família c-Jun N-terminal quinase (JNK), que também inclui MAPK9/JNK2 e MAPK10/JNK3. Essas quinases são codificadas por MAPK8, MAPK9 e MAPK10, respectivamente, e compartilham sítios de fosforilação conservados no loop de ativação (Thr183 em JNK1/JNK2 e Thr221 em JNK3).
• JNK1 é um mediador central da via de sinalização da proteína quinase ativada por estresse (SAP/JNK), a qual é estimulada por citocinas pró-inflamatórias e estresse físico. JNK1 ativada fosforila fatores de transcrição incluindo JUN, JDP2 e ATF2, regulando assim a atividade transcricional de AP-1 (PubMed:18307971).
  Referências relacionadas:
  PMID:18307971
• JNK1 promove a apoptose fosforilando p53/TP53 e YAP1 (PubMed:21364637). Também apoia a sobrevivência de células eritroides fosforilando BAD upon estimulação com EPO (PubMed:21095239) e medeia a autofagia induzida por inanição através da fosforilação de BCL2 (PubMed:18570871).
  Referências relacionadas:
  PMID:21364637, PMID:21095239, PMID:18570871
• JNK1 fosforila uma ampla gama de substratos incluindo CDT1 (PubMed:21856198), HSF4 (PubMed:16581800), SIRT1 (PubMed:17296730), ELK1, ITCH (PubMed:20027304), CLOCK-BMAL1 (PubMed:22441692), NLRP3 (PubMed:28943315) e SIRT6 (PubMed:27568560), implicando-o na replicação de DNA, ritmo circadiano, ativação do inflamassoma e respostas ao estresse celular.
  Referências relacionadas:
  PMID:21856198, PMID:16581800, TID:17296730, PMID:20027304, PMID:22441692, PMID:28943315, PMID:27568560
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas de JNK1 (alfa-1, alfa-2, beta-1, beta-2) com diferentes afinidades de ligação para c-Jun e ATF2, embora todas as isoformas fosforilem substratos com eficiência comparável.
• JNK1 localiza-se no citoplasma, núcleo e sinapses, permitindo que regule tanto a transcrição nuclear quanto eventos citoplasmáticos, como a captura de vesículas sinápticas via fosforilação de SYT4.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi produzido contra um peptídeo fosforilado sintético em torno de Thr183 do JNK1 humano. Este resíduo do loop de ativação (Thr183 em JNK1/JNK2, Thr221 em JNK3) é conservado entre os três membros da família JNK, explicando a multi-especificidade observada nas especificações.
• Para Western blotting, use tampões de lise suplementados com inibidores de fosfatases para preservar o sinal de fosforilação. Os pesos moleculares previstos variam de 35‑52 kDa, mas as posições reais das bandas podem variar devido à expressão de isoformas e modificações pós-traducionais; valide no sistema de amostra relevante.
• Em imuno-histoquímica e imunofluorescência, a detecção específica para fosfo pode exigir recuperação de antígeno e otimização cuidadosa das condições de fixação/permeabilização. Inclua sempre um controle não fosforilado ou tratamento com fosfatase para verificar a especificidade do sinal.
• Para aplicações de ELISA, considere emparelhar este anticorpo com um anticorpo de captura de JNK total para quantificar os níveis de fosforilação em relação à expressão total da proteína.

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