Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfo-LRRK2-S935 para WB e ELISA - Q5S007

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do LRRK2

• LRRK2 (proteína quinase 2 de serina/treonina com repetições ricas em leucina), também conhecido como Dardarin ou PARK8, é uma grande proteína multidomínica de 286 kDa pertencente à família ROCO. Contém repetições ricas em leucina, um domínio GTPase Roc, um domínio COR, um domínio quinase e repetições WD40.

• O LRRK2 funciona como uma quinase de serina/treonina e uma GTPase, fosforilando uma ampla gama de substratos envolvidos na plasticidade neuronal, imunidade inata, autofagia e tráfego de vesículas. Referências relacionadas: PMID:17114044 PMID:20949042 PMID:21850687

• É um regulador chave das GTPases RAB, fosforilando múltiplas proteínas RAB (incluindo RAB3, RAB8, RAB10, RAB12, RAB29, RAB35 e RAB43) para controlar sua associação à membrana e interações com efetores, modulando assim o tráfego de vesículas e a ciliogênese. Referências relacionadas: PMID:23395371 PMID:26824392 PMID:28720718

• O LRRK2 regula positivamente a autofagia via uma via dependente de cálcio CAMKK/AMPK e é recrutado para lisossomos sobrecarregados, onde fosforila RAB8A e RAB10 para promover a liberação do conteúdo lisossomal. Referências relacionadas: PMID:22012985 PMID:30209220 PMID:38227290

• Atua como um regulador positivo da imunidade inata ao mediar a fosforilação de RIPK2 a jusante de NOD1 e NOD2, aumentando assim a ativação de RIPK2. Referências relacionadas: PMID:27830463

• Localiza-se em múltiplos compartimentos celulares, incluindo vesículas citoplasmáticas, membrana do aparelho de Golgi, retículo endoplasmático, endossomos, lisossomos, membrana externa mitocondrial, vesículas sinápticas e projeções celulares como axônios e dendritos.

• Altamente expresso no cérebro, particularmente em neurônios piramidais, áreas dopaminoceptivas e na substância negra parte compacta; também expresso no coração, fígado, pulmão, rim e células imunes como neutrófilos. Referências relacionadas: PMID:29127255

• Mutações no LRRK2 são a causa genética mais comum da doença de Parkinson familiar, com variantes patogênicas agrupadas nos domínios GTPase e quinase.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Como este é um anticorpo específico para fosfo (anti-fosfo-S935), certifique-se de incluir inibidores de fosfatases durante o preparo da amostra para preservar os sinais de fosforilação.
• Para WB, o alto peso molecular (286 kDa) requer condições adequadas de separação; considere o uso de géis SDS-PAGE com baixa porcentagem e tempos de transferência estendidos.
• Valide a especificidade comparando sinais entre as formas fosforiladas e não fosforiladas; o bloqueio peptídico com o peptídeo fosforilado imunizante pode confirmar a especificidade para fosfo.
• A reatividade cruzada com LRRK2 de camundongo e rato (provavelmente o sítio de fosforilação equivalente) foi relatada; verifique a homologia da sequência do epítopo do imunógeno nestas espécies.
• Para ELISA, formatos diretos ou sanduíche típicos podem ser usados; titule a concentração do anticorpo no sistema de amostra relevante.

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