Anticorpo policlonal de coelho Anti-Fosfo-MAP2K3-S189/MAP2K6-S207 para WB, ELISA - P46734 / P52564

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Quinase 3 quinase ativada por mitógeno de dupla especificidade

• Codificado pelo gene MAP2K3, essa proteína também é conhecida como quinase MAPK/ERK 3 (MEK3), quinase quinase ativada por estresse 2 (SAPKK2) e MKK3.
• Atua como uma quinase de dupla especificidade, catalisando a fosforilação de resíduos de treonina e tirosina na quinase MAP p38 (MAPK14), ativando-a.
• É ativada por citocinas e estresse ambiental, desempenhando um papel crítico na resposta celular ao estresse e na sinalização inflamatória.
• Participa de uma cascata de sinalização iniciada pelo receptor adrenérgico ADRA1B, levando à ativação de MAPK14.
• É amplamente expressa em todos os tecidos, com expressão particularmente abundante no músculo esquelético.
• Está sujeita a splicing alternativo e modificações pós-traducionais, incluindo acetilação e fosforilação, que regulam sua atividade e interações.
• A quinase relacionada MAP2K6 (MKK6) também ativa quinases p38 MAP e compartilha o sítio de fosforilação S207 reconhecido por este anticorpo.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Como o imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético ao redor da região S189 de MAP2K6/MAP2K3, prevê-se que o anticorpo reconheça especificamente as formas fosforiladas dessas quinases. Valide a especificidade usando tratamento com fosfatase ou bloqueio com peptídeo não fosforilado em Western blot e ELISA.
• Para Western blot, considere otimizar a diluição do anticorpo e as condições de bloqueio para reduzir a ligação inespecífica. Os pesos moleculares previstos são em torno de 36–39 kDa para MAP2K3 e 31–37 kDa para MAP2K6, dependendo das isoformas.
• Este anticorpo pode ser adequado para detectar alterações na fosforilação após estimulação. Confira isso tratando as células com fatores de estresse relevantes (por exemplo, citocinas, choque osmótico) e monitorando as mudanças de banda ou a intensidade do sinal.
• Em ELISA, use revestimentos adequados de peptídeo fosforilado e considere ensaios de competição com peptídeos não fosforilados para garantir a fosfo-especificidade.

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