Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfo-MAP2K4 (S257) para WB, IHC-P - P45985

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MAP2K4

• A quinase de especificidade dupla mitógeno-ativada por proteína quinase 4 (MAP2K4), também conhecida como JNKK1, MEK4, MKK4, SEK1, SKK1, SERK1, MAPKK4, PRKMK4, SAPKK1.
• Componente essencial da via de sinalização da proteína quinase ativada por estresse / quinase N-terminal c-Jun (SAP/JNK), ativando diretamente JNK1, JNK2 e JNK3.
• Juntamente com MAP2K7, MAP2K4 é uma das únicas duas quinases que fosforilam e ativam diretamente JNKs; MAP2K4 fosforila preferencialmente o resíduo de tirosina no motivo Thr-Pro-Tyr, enquanto MAP2K7 tem como alvo a treonina.
• Também ativa p38 MAPKs (MAPK11, MAPK12, MAPK13, MAPK14), distinguindo-a de MAP2K7, que ativa exclusivamente JNKs.
• Envolvida na sinalização de morte mitocondrial, promovendo a liberação de citocromo c e apoptose.
• A localização subcelular é principalmente citoplasmática, com alguma presença nuclear.
• Amplamente expressa com expressão particularmente abundante no músculo esquelético.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação em S257 e outros locais, acetilação e metilação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopeptídeo sintético em torno de S257; espera-se que o anticorpo reconheça MAP2K4 fosforilado neste local. Para Western blot, é prevista uma banda em aproximadamente 44 kDa.
• Inclua inibidores de fosfatases durante o preparo da amostra para preservar a fosforilação. Valide a especificidade usando competição com peptídeo não fosforilado ou tratamento com fosfatase.
• Para IHC-P e IF/ICC, otimize a recuperação de antígenio e considere o uso de controles específicos para fosfo e proteína total para confirmar a localização.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato permite aplicação em modelos de roedores; valide o anticorpo no contexto de tecido ou linhagem celular relevante.
• Para ELISA e IP, recomenda-se a realização de experimentos de titulação para determinar as concentrações de trabalho ideais.

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