Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Fosfo-MAPKAPK2 (T334) para WB, ELISA - P49137

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MAPKAPK2 (MK2)

• O MAPKAPK2 é uma serina/treonina quinase ativada por estresse que fosforila numerosos substratos envolvidos na produção de citocinas, endocitose, reorganização do citoesqueleto, migração celular, resposta a danos ao DNA e regulação transcricional.
• Medeia a fosforilação de HSF1, promovendo a interação com HSP90 e, assim, inibindo a homotrimerização de HSF1, a ligação ao DNA e a transativação, o que modula a resposta ao choque térmico.
  Referências relacionadas: PMID:16278218
• Na sinalização inflamatória, o MAPKAPK2 regula pós-transcricionalmente a produção de TNF e IL6 ao fosforilar proteínas de ligação a elementos ricos em AU (ARE) ELAVL1, HNRNPA0, PABPC1 e TTP/ZFP36, afetando a estabilidade e tradução do mRNA de citocinas.
• A quinase participa da via de dano ao DNA ao se redistribuir do núcleo para o citoplasma sob estresse genotóxico e fosforilar HNRNPA0 e PARN, levando à estabilização do mRNA de GADD45A e contribuindo para o ponto de verificação G2/M.
• Sob estresse induzido por UV, o MAPKAPK2 fosforila CEP131, o que aumenta sua ligação a proteínas 14-3-3 e inibe a formação de novos satélites centriolares, ligando-o à biologia dos centríolos.
  Referências relacionadas: PMID:26616734
• O MAPKAPK2 é expresso de forma onipresente em tecidos humanos e localiza-se tanto no citoplasma quanto no núcleo, sendo sua distribuição subcelular crucial para a especificidade funcional.
• É classificado sob palavras-chave incluindo ligação de ATP, quinase, serina/treonina-proteína quinase, fosfoproteína e via de conjugação Ubl, refletindo seus papéis regulatórios.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo reconhece especificamente a fosforilação na treonina 334 (T334) do MAPKAPK2 humano. Para detectar o sinal de fosfo, estimule as células com indutores de estresse (por exemplo, anisomicina, UV) e inclua inibidores de fosfatases nos tampões de lise.
• Para análise por Western blot, valide a especificidade comparando sinais com e sem tratamento com fosfatase, ou por competição de peptídeo usando o peptídeo imunógeno fosforilado versus não fosforilado.
• Embora o anticorpo seja recomendado para WB e ELISA, usuários que expandirem para outras aplicações (por exemplo, IHC, IF) devem otimizar as condições e confirmar a reatividade cruzada com a espécie de sua amostra.
• Dada sua reatividade cruzada com humano, camundongo e rato, este anticorpo pode ser empregado em organismos modelo comuns; no entanto, execute sempre os controles apropriados para confirmar a reatividade da espécie em seu sistema experimental.
• Para ensaios baseados em ELISA, considere otimizar as concentrações de revestimento e os anticorpos de detecção para alcançar a melhor relação sinal-ruído.
• Como com qualquer anticorpo específico para fosfo, ciclos repetidos de congelamento-descongelamento podem reduzir a afinidade; alíquota e armazene a -20°C após o uso inicial.

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