Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Fosfo-MARCKS-S158 para WB - P29966

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MARCKS

• O substrato da cinase C rico em alanina e miristoilado (MARCKS) é um substrato principal da PKC que regula a dinâmica do citoesqueleto de actina, motilidade celular, adesão, fagocitose e exocitose via sequestro de fosfolipídios de membrana (particularmente PIP2) e ancoragem de proteínas (PubMed:23704996, PubMed:36009319). Referências relacionadas: PMID:23704996, PMID:36009319
• Em células quiescentes, o MARCKS sequestra PIP2 em rafts lipídicos, inibindo a exocitose; a fosforilação pela PKC reverte essa regulação, ligando a sinalização de cinases ao tráfego de membrana (PubMed:23704996). Referências relacionadas: PMID:23704996
• O MARCKS promove a migração, adesão e secreção de citocinas (por exemplo, TNF) de células inflamatórias em macrófagos e medeia a produção de ROS induzida por bactérias em monócitos (PubMed:37949888). Referências relacionadas: PMID:37949888
• A proteína participa na iniciação e crescimento do neurito e no desenvolvimento do axónio através da interação com a fusão de vesículas positivas para CDC42 e RAB10 no cone de crescimento (Por similaridade).
• O MARCKS é detetado em espermatozoides e é amplamente expresso; a sua localização subcelular abrange a membrana plasmática, citoplasma e citoesqueleto, refletindo um trânsito intracelular dinâmico.
• As modificações pós-traducionais incluem miristoilação no terminal N (ancoragem à membrana), fosforilação em Ser158 (alvo da PKC) e acetilação, todas críticas para a função e localização.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfo-peptídeo sintético correspondente aos resíduos circundantes à Ser158. Para WB, use o manuseio padrão de proteínas fosforiladas: inclua inibidores de fosfatases nos tampões de lise e evite stripping/reprobing excessivo.
• Valide a especificidade do anticorpo tratando as amostras com fosfatase alcalina ou usando bloqueio com peptídeo não fosforilado para confirmar o sinal dependente de fosforilação.
• Banda esperada: ~32 kDa, mas note que o MARCKS pode aparecer mais alto devido a modificações pós-traducionais e migração anómala.
• Para reatividade cruzada de espécies, relata-se que o anticorpo deteta humano, camundongo e rato; verifique no seu sistema modelo com controlos positivos apropriados (por exemplo, células estimuladas por PKC).

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