Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Fosfo-MEK2 (T394) para WB e IF/ICC - P36507

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da MEK2

• A MEK2 (MAP2K2) é uma proteína quinase ativada por mitógeno de especificidade dupla que catalisa a fosforilação de resíduos de treonina e tirosina no motivo Thr-Glu-Tyr das quinases MAP a jusante, incluindo ERK1 e ERK2.
• Funciona como um componente central da cascata de sinalização MAPK/ERK, ativando diretamente ERK1 e ERK2 em resposta a estímulos a montante, regulando assim a proliferação, diferenciação e sobrevivência celular.
• A MEK2 facilita a ativação do BRAF ao ligar-se a KSR1 ou KSR2, o que liberta interações inibitórias intramoleculares e promove a dimerização KSR-BRAF, melhorando a propagação do sinal. Referências relacionadas: PMID:29433126
• A proteína localiza-se predominantemente no citoplasma e na membrana, consistente com o seu papel na transmissão de sinais extracelulares para efetores intracelulares.
• A fosforilação em Thr-394 (o epítopo visado por este anticorpo) é uma modificação pós-traducional regulatória crítica; a MEK2 também está sujeita a acetilação, influenciando a sua atividade e interações.
• A MEK2 contém um bolso de ligação ao ATP e requer iões de magnésio para a atividade catalítica, classificando-a como uma quinase de especificidade dupla para serina/treonina e tirosina.
• Mutações no MAP2K2 foram implicadas em doenças humanas, incluindo cardiomiopatia, displasia ectodérmica e deficiência intelectual, sublinhando a sua importância biológica.
• O peso molecular previsto da MEK2 é de aproximadamente 44 kDa, alinhando-se com a banda esperada observada em análises de Western blot.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio foi um peptídeo fosfo-específico, garantindo reatividade apenas com a forma fosforilada T394; valide a especificidade tratando lisados com lambda fosfatase ou por ensaios de competição de peptídeos.
• Para Western blot, deve ser detetada uma banda em torno de 44 kDa em linhagens de células humanas estimuladas; inclua controlos positivos não tratados e tratados com fatores de crescimento para confirmar a dependência da fosforilação.
• Ao realizar IF/ICC, otimize as condições de fixação e permeabilização e considere a coloração simultânea com um anticorpo total de MEK2 para distinguir os estados de fosforilação.
• A reatividade cruzada com outras espécies não foi relatada; os investigadores devem validar o anticorpo no seu sistema modelo se utilizarem amostras não humanas.

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