Anti-Fosfo-MET-Y1234/1235 pAb de Coelho para WB, ELISA - P08581

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MET

• O MET, também conhecido como recetor do fator de crescimento dos hepatócitos (HGFR), proto-oncogene c-Met e recetor do fator de dispersão, é uma tirosina cinase recetora que transduz sinais da matriz extracelular após ligação ao seu ligando HGF. Regula processos chave como proliferação, dispersão, morfogénese e sobrevivência.
• Após a ligação do ligando, o MET sofre autofosforilação em resíduos de tirosina, incluindo Y1234 e Y1235 no ciclo de ativação, o que cria locais de ancoragem para efetores a jusante como PI3K, PLCG1, SRC, GRB2, STAT3 e GAB1. Isto desencadeia múltiplas cascatas: RAS-ERK (efeitos morfogenéticos), PI3K-AKT (pró-sobrevivência) e vias PLCgamma-PKC.
• Durante o desenvolvimento embrionário, a sinalização do MET é essencial para a gastrulação, migração de precursores neuronais, angiogénese, formação renal e desenvolvimento muscular esquelético (migração de precursores musculares e proliferação de mioblastos secundários). Em adultos, contribui para a cicatrização de feridas, regeneração de órgãos, remodelação tecidual e hematopoiese.
• O MET localiza-se principalmente na membrana celular, mas também existe uma forma secretada. É expresso em hepatócitos normais e células epiteliais que revestem o estômago, intestino delgado e grosso, bem como em queratinócitos basais do esófago e pele. Observa-se elevada expressão no fígado, trato gastrointestinal, tiróide, rim e cérebro, com níveis proteicos detetáveis no ósso metafisário. Referências relacionadas: PMID:26637977
• A proteína atua como recetor para a internalina InlB da Listeria monocytogenes, mediando a entrada bacteriana nas células hospedeiras.
• O MET é classificado como uma tirosina proteína cinase, glicoproteína e fosfoproteína, e está associado a rearranjos cromossómicos ligados à doença. Também está sujeito a splicing alternativo e conjugação de ubiquitina.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio utilizado para este anticorpo é um péptido fosforilado sintético que abrange Y1234 e Y1235 do MET humano. Para WB e ELISA, considere incluir competição com não-péptido fosforilado ou lisados tratados com fosfatase para confirmar a especificidade da fosforilação.
• Para WB, espera-se uma banda aproximadamente a 156 kDa. Uma vez que o MET é uma proteína de membrana, use tampões de lise apropriados (ex: RIPA) e inclua inibidores de proteases/fosfatasas. Para ELISA, valide o anticorpo com péptido fosforilado revestido e controlos apropriados.
• Estimular as células com HGF antes da lise pode melhorar a deteção do MET fosforilado nestes locais. Esteja ciente dos níveis basais de fosforilação na sua linha celular de interesse.
• Este anticorpo é validado para amostras humanas; a reatividade cruzada com outras espécies não está estabelecida.

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