Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfo-MKK3 (S189) + MKK6 (S207) para WB/IF/ELISA - P46734 / P52564

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de MKK3 e MKK6

• MKK3 (MAP quinase quinase 3), também conhecida como MEK3 ou SAPKK2, é codificada pelo gene MAP2K3 e pertence à família das proteínas quinases de dupla especificidade. Está intimamente relacionada à MKK6 (codificada por MAP2K6): ambas as proteínas compartilham alta homologia e funcionam como ativadores chave das quinases p38 MAPK.
• Como quinase de dupla especificidade, MKK3 catalisa a fosforilação concomitante de resíduos de treonina e tirosina na alça de ativação das isoformas da quinase p38 MAPK, um passo crítico na sinalização responsiva ao estresse.
• MKK3 é ativada por diversos estresses ambientais e citocinas pró-inflamatórias in vivo, conectando sinais extracelulares a respostas intracelulares como inflamação, diferenciação e apoptose.
• Ela atua dentro de uma via de transdução de sinal iniciada pelo receptor adrenérgico ADRA1B, levando à ativação de MAPK14 (p38α), destacando seu papel na sinalização por receptores acoplados à proteína G.
• No nível tecidual, MKK3 apresenta expressão abundante no músculo esquelético e é amplamente expressa em outros tecidos, sugerindo amplo envolvimento na regulação do estresse e do metabolismo.
• As modificações pós-traducionais de MKK3 incluem acetilação e fosforilação; o resíduo S189 é um sítio de ativação crítico. A proteína também sofre splicing alternativo, produzindo múltiplas isoformas.
• MKK3 está associada a variantes patológicas e sua desregulação tem sido implicada em condições patológicas, destacando sua importância como alvo terapêutico.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Como este anticorpo reconhece a fosforilação na S189 de MKK3 e S207 de MKK6, utilize inibidores de fosfatase durante a lise celular e preparação de amostras para preservar os sinais de fosforilação.
• Para Western blot, considere carregar controles positivos tratados com indutores de estresse (por exemplo, anisomicina, UV ou choque osmótico) para verificar a reatividade do anticorpo contra as formas ativadas.
• Na imunofluorescência, valide o anticorpo em linhagens celulares relevantes sob condições estimuladas versus não estimuladas para confirmar a localização específica do sinal fosforilado.
• Múltiplas bandas correspondentes a diferentes isoformas e variantes de splicing (pesos moleculares relatados em torno de 36–39 kDa para MKK3 e 31–37 kDa para MKK6) podem ser observadas; consulte os pesos moleculares específicos e certifique-se de usar marcadores de peso molecular adequados.

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