Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfo-mTOR-S2448 para WB, IF/ICC, ELISA - P42345

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da mTOR

• A serina/treonina-proteína quinase mTOR (também conhecida como FRAP, RAFT1, RAPT1) atua como um regulador central do metabolismo, crescimento e sobrevivência celular, integrando sinais de hormônios, fatores de crescimento, nutrientes, energia e estresse. Referências relacionadas: PMID:12087098, PMID:12150925, PMID:12150926

• A mTOR funciona em dois complexos distintos, mTORC1 e mTORC2, que controlam processos anabólicos e do citoesqueleto, respectivamente. Referências relacionadas: PMID:15268862, PMID:15467718, PMID:18497260

• Através do mTORC1, ela promove a síntese proteica ao fosforilar reguladores da tradução (por exemplo, EIF4EBP1, RPS6KB1/RPS6KB2) e aumenta a síntese de lipídios e nucleotídeos (via SREBF1, CAD e via das pentoses fosfato). Referências relacionadas: PMID:12087098, PMID:12150925, PMID:12150926, PMID:24403073, PMID:29236692, PMID:18925875, PMID:23429703, PMID:23429704

• O mTORC1 também inibe vias catabólicas, principalmente a autofagia, ao fosforilar ULK1, DAP, RUBCNL e AMBRA1 sob condições ricas em nutrientes. Referências relacionadas: PMID:32561715, PMID:20537536, PMID:30704899, PMID:23524951, PMID:25438055

• O complexo mTORC2 media a sinalização de fatores de crescimento ao ativar quinases AGC (AKT, PKC, SGK1) e regular o citoesqueleto de actina e a sinalização da insulina. Referências relacionadas: PMID:15268862, PMID:15467718, PMID:21376236, PMID:15718470, PMID:24670654, PMID:18925875

• A mTOR se localiza em múltiplas membranas celulares, incluindo o lisossomo (para ativação do mTORC1), bem como no retículo endoplasmático, Golgi, mitocôndrias e membrana plasmática; ela também se desloca para o núcleo.

• Expressa em muitos tecidos com os níveis mais altos no testículo.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo reconhece especificamente a fosforilação na Ser2448 da mTOR; considere incluir inibidores de fosfatase em tampões de lise para imunoblotting.
• Para Western blot (WB), valide o anticorpo em seu sistema de amostra sob condições que ativam a mTOR (por exemplo, estimulação por fator de crescimento) para confirmar a especificidade para fosfo.
• Na imunofluorescência (IF/ICC), otimize os protocolos de fixação e permeabilização para preservar o epítopo fosfo enquanto garante acesso adequado do anticorpo.
• Como a mTOR é uma proteína grande (289 kDa), use porcentagens de gel apropriadas (por exemplo, SDS-PAGE de 6–8%) e tempos de transferência prolongados para o blotting.

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