Anti-Fosfo-NFKB1-S337 Rabbit mAb para WB, ELISA - P19838

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NFKB1

• O NFKB1 codifica a proteína precursora p105, que é processada na subunidade ativa p50 do complexo do fator de transcrição NF-kappa-B. A forma p105 também retém proteínas NF-kappa-B no citoplasma. Referências relacionadas: PMID:1423592
• O complexo NF-kappa-B é um fator de transcrição pleiotrópico presente em quase todos os tipos celulares e regula genes envolvidos na inflamação, imunidade, diferenciação, crescimento celular e apoptose.
• A subunidade ativa p50 forma heterodímeros com RELA/p65 para criar o complexo p65-p50, um importante ativador transcricional que se liga à sequência consenso kappa-B nos intensificadores dos genes alvo. Referências relacionadas: PMID:1740106, PMID:7830764
• Os homodímeros p50-p50 atuam como repressores transcricionais, mas podem tornar-se ativadores quando associados ao BCL3.
• O NFKB1/p105 também reprime a sinalização MAPK induzida por MAP3K8 até que a degradação dependente de proteassoma libere o MAP3K8 ativo.
• A localização subcelular alterna entre citoplasma (inativo, ligado a inibidores) e núcleo (ativo, após liberação do I-kappa-B).
• A fosforilação na serina 337 é uma das múltiplas modificações pós-traducionais que regulam a atividade, processamento ou interações do NFKB1; este anticorpo reconhece especificamente a forma fosforilada nesse local.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopeptídeo sintético ao redor de S337; confirme a especificidade usando amostras tratadas com fosfatase ou competindo com peptídeo não fosforilado.
• Para Western blot, considere usar amostras de células estimuladas para ativar a sinalização NF-kappa-B (por exemplo, com TNF-α) para observar mudanças de banda específicas de fosfo em 85kDa/105kDa.
• A detecção por ELISA pode ser otimizada emparelhando com um anticorpo total de NFKB1 ou usando detecção específica para fosfo.
• Valide em linhagens de células humanas ou tecidos com ativação conhecida de NF-kappa-B; a reatividade cruzada com outras espécies não é garantida.
• Inclua sempre controles negativos e positivos apropriados para distinguir o sinal dependente de fosforilação.

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