Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Fosfo-NFKB1 (S932) para WB - P19838

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NFKB1

• O gene NFKB1 codifica a proteína precursora p105, que é subsequentemente processada para produzir a subunidade ativa p50 (Fator nuclear NF-kappa-B p50) (PubMed:1423592). Referências relacionadas: PMID:1423592
• O precursor p105 também atua como uma proteína de retenção citoplasmática para outros membros da família NF-kB, sequestrando-os no citoplasma até que sinais de ativação sejam recebidos.
• A subunidade p50 forma heterodímeros com RELA/p65 para constituir o complexo canônico NF-kB p65-p50, que se liga à sequência consenso kB 5'-GGRNNYYCC-3' e ativa a transcrição de genes alvo (PubMed:1740106, 7830764). Referências relacionadas: PMID:1740106 PMID:7830764
• NF-kB é um fator de transcrição pleiotrópico envolvido em inflamação, resposta imune, proliferação celular, diferenciação e apoptose, atuando como um mediador central da sinalização induzida por estresse e patógenos.
• O complexo NF-kB inativo é retido no citoplasma por inibidores IkB; após estímulo, IkB é fosforilado por quinases IKK e degradado, liberando NF-kB para translocar para o núcleo e regular a expressão gênica.
• NFKB1 está sujeito a extensas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação, ubiquitinação e hidroxilação, que modulam sua estabilidade, atividade de ligação ao DNA e competência transcricional.
• Localização subcelular: Encontrado tanto no citoplasma quanto no núcleo, com o tráfego entre esses compartimentos rigidamente controlado por vias de sinalização dependentes de estímulo.
• Isoformas alternativamente processadas e múltiplos membros da família (RELA, RELB, REL, NFKB2) geram combinações de dímeros diversas com funções distintas, desde ativação transcricional até repressão.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopeptídeo sintético correspondente aos resíduos ao redor da Ser932 do NFKB1 humano; este anticorpo é projetado para reconhecer NFKB1 apenas quando fosforilado neste sítio.
• Para Western blot, inclua inibidores de fosfatase durante o preparo da amostra para preservar o estado de fosforilação, e considere comparar lisados celulares estimulados vs. não estimulados para confirmar a especificidade fosfo.
• O peso molecular previsto do precursor p105 é ~105 kDa, enquanto a subunidade processada p50 migra a ~50 kDa; ambas as bandas podem ser detectadas dependendo das condições da amostra.
• Este anticorpo foi validado para Western blot em amostras humanas, de camundongo e rato; outras aplicações não foram testadas e devem ser otimizadas pelo usuário final.

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