Anticorpo Policlonal Anti-Fosfo-NMDAR1 (S896/S897) para WB, ELISA - Q05586

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NMDAR1 (GluN1)

• Codificado pelo gene GRIN1, a proteína GluN1 (também designada NR1, NMDAR1) é a subunidade obrigatória dos receptores NMDA, essenciais para a neurotransmissão excitatória no sistema nervoso central.
• Os receptores NMDA formam canais catiônicos heterotetraméricos ativados por ligante com alta permeabilidade ao cálcio e bloqueio dependente de voltagem por magnésio, contribuindo para a plasticidade sináptica, aprendizagem e memória (PubMed:21376300, PubMed:26875626, PubMed:26919761). Referências relacionadas: PMID:21376300 PMID:26875626 PMID:26919761
• A subunidade GluN1 se associa com subunidades GluN2 (A-D) ou GluN3 (A-B) para formar receptores NMDA funcionais; diferentes composições de subunidades conferem propriedades farmacológicas e cinéticas distintas ao canal (PubMed:26875626, PubMed:26919761, PubMed:36309015). Referências relacionadas: PMID:26875626 PMID:26919761 PMID:36309015
• A abertura do canal requer a ligação coincidente de L-glutamato à subunidade GluN2 e glicina ou D-serina à subunidade GluN1, juntamente com despolarização da membrana para aliviar o bloqueio dependente de voltagem do Mg²⁺; isso permite o influxo de Ca²⁺ e Na⁺ e o efluxo de K⁺ (PubMed:21376300, PubMed:26875626, PubMed:26919761). Referências relacionadas: PMID:21376300 PMID:26875626 PMID:26919761
• O domínio C-terminal da GluN1 está sujeito a extensa modificação pós-traducional, incluindo fosforilação nos resíduos Ser896 e Ser897, o que pode modular o tráfego e a função do receptor.
• Os receptores NMDA estão predominantemente localizados na membrana da densidade pós-sináptica das sinapses excitatórias, colocando-os no núcleo da sinalização e plasticidade sináptica.
• Mutações no GRIN1 estão associadas a distúrbios do neurodesenvolvimento, incluindo epilepsia, deficiência intelectual e encefalopatia epilética e do desenvolvimento (DEE101), destacando o papel crítico da GluN1 na função cerebral.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Como este anticorpo reconhece a fosforilação em S896/S897, inclua inibidores de fosfatase durante o preparo da amostra para preservar o epítopo fosfo.
• Para western blot, o peso molecular previsto do NMDAR1 é ~105 kDa; use uma porcentagem de gel apropriada (por exemplo, SDS-PAGE de 8–10%) e condições de transferência para proteínas de alto peso molecular.
• Valide a especificidade por ensaios de competição com peptídeo: pré-incube o anticorpo com o peptídeo imunogênico fosforilado ou um peptídeo não fosforilado para confirmar o reconhecimento fosfo-específico.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado com o peptídeo fosforilado como antígeno de revestimento; otimize a concentração de revestimento e as condições de detecção.
• Considere usar lisados de controle positivo de tecido cerebral humano, de camundongo ou rato ou linhas celulares neurais conhecidas por expressarem NMDAR1.
• A reatividade cruzada com humano, camundongo e rato indica um epítopo conservado; no entanto, realize a validação na espécie e sistema modelo relevantes.

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