Anticorpo Policlonial de Coelho Anti-Fosfo-NPM1-T199 para WB, ELISA - P06748

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Nucleofosmina

• A nucleofosmina (NPM1, também conhecida como B23, NO38, numatrina) é uma fosfoproteína nucleolar essencial para a biogênese de ribossomos, coordenando o processamento de rRNA e a exportação nuclear de ribossomos.
• Atua como uma chaperona de histonas para as histonas centrais H3, H2B e H4, facilitando a montagem correta da cromatina e a formação de nucleossomos.
• Regula a duplicação de centrossomos e a replicação de centríolos; a fosforilação por PLK2 desencadeia a replicação de centríolos.
• Regula negativamente a ativação de EIF2AK2/PKR e suprime a apoptose; antagoniza o bloqueio G2/M induzido por ATF5 para promover a proliferação celular. Referências relacionadas: PMID:22528486
• Interage com MYC para aumentar a transcrição dos genes alvo de MYC, potencialmente contribuindo para a oncogênese. Referências relacionadas: PMID:25956029
• Localiza-se predominantemente no nucléolo, mas também é encontrada no nucleoplasma, citoplasma e centrossomos, refletindo suas múltiplas funções celulares.
• Está sujeita a inúmeras modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação (ex.: Thr199), acetilação, ADP-ribosilação e ubiquitinação, que modulam sua atividade e tráfego subcelular.
• A superexpressão e mutações (ex.: deslocamento citoplasmático) estão associadas à leucemia mieloide aguda e outros cânceres, destacando seu papel como proto-oncogene.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este anticorpo fosfo-específico foi desenvolvido contra um peptídeo sintético fosforilado em Thr199; para WB, inclua inibidores de fosfatase durante a preparação da amostra para preservar a fosforilação.
• Valide o anticorpo em seu sistema experimental comparando os sinais entre lisados não tratados e tratados com fosfatase, ou usando bloqueio com peptídeo não fosforilado.
• Para ELISA, revesta com peptídeo fosforilado para avaliar a especificidade e considere testes de reatividade cruzada com NPM1 não fosforilado.
• Como o NPM1 se transloca para o citoplasma sob certas condições, o fracionamento ou a imunofluorescência podem complementar a detecção da distribuição subcelular do NPM1 fosforilado.

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