Anticorpo Policlonar de Coelho Anti-Fosfo-NRF2-S40 para WB, IF/ICC, ELISA - Q16236

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do NRF2

• Identidade Proteica: NRF2 (fator 2 relacionado ao eritróide nuclear 2), codificado pelo gene NFE2L2, é um fator de transcrição de zipper de leucina básico (bZIP) que pertence à família cap 'n' collar (CNC).
• Regulação da Resposta Antioxidante: O NRF2 se liga a elementos de resposta antioxidante (ARE) nos promotores de genes citoprotetores, incluindo enzimas desintoxicantes de fase 2, para promover sua expressão e neutralizar eletrófilos reativos. Referências relacionadas: PMID:11035812, PMID:19489739, PMID:29018201
• Degradação Mediado por KEAP1: Em condições basais, o NRF2 é direcionado para ubiquitinação e degradação proteassômica pelo complexo BCR(KEAP1), mantendo seus níveis citoplasmáticos baixos. Referências relacionadas: PMID:11035812, PMID:15601839, PMID:29018201
• Ativação por Estresse Oxidativo: Após o estresse oxidativo, metabólitos eletrófilos inibem a atividade da KEAP1, permitindo que o NRF2 se acumule e se transloca para o núcleo, onde forma heterodímeros com proteínas Maf pequenas e ativa a transcrição. Referências relacionadas: PMID:19489739, PMID:29590092
• Ativação Mediado por Autofagia: A autofagia seletiva também desencadeia a ativação do NRF2 por meio da inativação do complexo KEAP1 mediada por SQSTM1/p62, ligando a autofagia à homeostase redox. Referências relacionadas: PMID:20452972
• Imunidade Inata e Defesa Antiviral: O NRF2 reprime a detecção de DNA citoplasmático antiviral suprimindo a expressão de STING1 e limita a liberação de citocinas pró-inflamatórias durante infecções virais, incluindo SARS-CoV-2, por meio da inibição de IRF3. Ele também inibe a replicação de múltiplos vírus de maneira independente de interferon. Referências relacionadas: PMID:30158636, PMID:33009401
• Localização Subcelular e Modificações Pós-Traducionais: O NRF2 trafega entre o citoplasma e o núcleo. Ele está sujeito a múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação e ubiquitinação, que controlam rigidamente sua estabilidade e atividade transcripcional.
• Distribuição Tecidual: O NRF2 é amplamente expresso, com os níveis mais altos detectados no músculo adulto, rim, pulmão, fígado e músculo fetal.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético correspondente aos resíduos ao redor da Ser40 do NRF2 humano. Para detecção específica de fosforilação, confira que o epítopo está exposto no seu sistema experimental; considere o tratamento da amostra com inibidores de fosfatase para preservar o sinal de fosforilação.
• Ao realizar Western blot, o peso molecular previsto é de ~68 kDa; verifique a especificidade da banda usando controles positivos e negativos (por exemplo, células com estresse oxidativo vs. células não tratadas ou modelos de knockdown de KEAP1).
• Para IF/ICC, otimize as condições de fixação e permeabilização para manter a integridade do epítopo fosforilado; use fixação com PFA a 4% e permeabilização com detergente suave como ponto de partida.
• Este anticorpo é adequado para WB, IF/ICC e ELISA. É recomendado titular o anticorpo para cada aplicação e validar nos tipos de amostras humanas relevantes.

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