Anticorpo Monoclonal Anti-Fosfo-p38 MAPK (T180) para WB, IHC-P, ELISA - Q16539 / P53778 / Q15759

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da p38 MAPK (MAPK14)

• A MAPK14 (p38 alfa) é uma quinase serina/treonina e um componente central da via de transdução de sinal da MAP quinase, respondendo a estímulos de estresse e citocinas pró-inflamatórias; é um dos quatro membros da família p38 MAPK com uma estimativa de 200–300 substratos por quinase.
• A quinase ativa rapidamente quinases a jusante, incluindo MAPKAPK2/MK2 e MAPKAPK3/MK3, que regulam a expressão gênica pós-transcricionalmente fosforilando proteínas de ligação ao mRNA, como ZFP36 e ELAVL1, e modulando o fator de alongamento da tradução EEF2K.
  Referências relacionadas:
  PMID:11154262
• No núcleo, a p38 MAPK fosforila fatores de transcrição (ATF1, ATF2, ATF6, ELK1, MEF2, p53, etc.) e remodeladores de cromatina, permitindo a indução rápida de genes imediatos precoces e inflamatórios; a fosforilação da histona H3 (Ser‑10) por MSK1/2 facilita o recrutamento de NF‑κB.
  Referências relacionadas:
  PMID:9687510
  PMID:9792677
  PMID:10330143
  PMID:9430721
  PMID:9858528
• A quinase se desloca entre o citoplasma e o núcleo e está envolvida em diversos processos celulares: regula a renovação de proteínas (ex.: estabilidade de CFLAR, degradação de EGLN3 mediada por SIAH2), autofagia (tráfego de ATG9), endocitose de receptores (EGFR via efetores RAB5A) e clivagem do ectodomínio (fosforilação de ADAM17).
  Referências relacionadas:
  PMID:17003045
  PMID:19893488
  PMID:16932740
  PMID:20188673
• A MAPK14 sofre fosforilação em Thr‑180 e Tyr‑182 dentro do alça de ativação, um evento duplo essencial para a atividade da quinase; modificações pós‑traducionais adicionais incluem acetilação e ubiquitinação, conforme indicado nas palavras-chave do UniProt.
• A proteína é amplamente expressa, com os níveis mais altos no cérebro, coração, placenta, pâncreas e músculo esquelético; expressão mais baixa é observada no pulmão, fígado e rim.
• O splicing alternativo gera isoformas como MXI2 (responsiva a mitógenos e estresse oxidativo) e EXIP (implicada no início precoce da apoptose) que exibem preferências de substrato e resultados de sinalização diferenciados.
• Em resposta a danos no DNA, a MAPK14 fosforila CDC25B/C levando à parada em G2, e TIAR para estabilizar o mRNA de GADD45A; também ativa o inflamassoma NLRP1 após UV‑B ou colisões de ribossomos.
  Referências relacionadas:
  PMID:11333986
  PMID:20932473
  PMID:35857590

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a um peptídeo fosforilado em torno de Thr‑180; portanto, o anticorpo detecta principalmente a p38 MAPK ativada (fosforilada). Para verificação, considere tratar amostras com λ‑fosfatase ou usar lisados de controle não estimulados para confirmar a especificidade para fosfo em Western blot.
• Para imuno-histoquímica (IHC‑P), a recuperação de antígeno por micro-ondas ou panela de pressão pode melhorar a detecção de fosfo-epítopos; valide a especificidade da coloração pré-incubando o anticorpo com o fosfopeptídeo imunizante.
• Aplicações de ELISA podem usar o anticorpo como reagente de captura ou detecção para quantificar a p38 ativada em lisados celulares; inclua proteína p38 fosforilada recombinante como controle de curva padrão, se possível.
• Ao analisar múltiplas isoformas de p38, observe que este anticorpo provavelmente reage de forma cruzada com p38 beta (MAPK11) e gama (MAPK13) devido à alta homologia de sequência em torno de Thr‑180; valide a especificidade da isoforma no sistema de amostra relevante.

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