Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfo-p38 MAPK (Y182) para WB, IF/ICC, ELISA - Q16539

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da p38 MAPK (MAPK14)

• A MAPK14 é uma quinase serina/treonina que atua como um componente essencial da via de transdução de sinal da MAP quinase, mediando respostas celulares a estímulos extracelulares, como citocinas pró-inflamatórias e estresse físico.
• Ela fosforila e ativa fatores de transcrição (por exemplo, CREB1, ATF1, RELA, STAT1, STAT3) e a histona H3 por meio das quinases downstream MSK1 e MSK2, induzindo assim genes de resposta imediata ao estresse ou estímulos mitogênicos. Referências relacionadas: PMID:9687510 PMID:9792677
• A MAPK14 regula a síntese proteica ao ativar MKNK1/MNK1 e MKNK2/MNK2, que fosforilam o fator de iniciação EIF4E2. Referências relacionadas: PMID:11154262
• Ela modula a renovação de proteínas através da fosforilação da ligase de ubiquitina SIAH2, controlando a degradação de EGLN3, e também interfere na autofagia ao afetar o tráfego de ATG9. Referências relacionadas: PMID:17003045 PMID:19893488
• No citoplasma, a via da p38 MAPK é um importante regulador da endocitose; por exemplo, a internalização do EGFR mediada por clatrina induzida por citocinas inflamatórias e irradiação UV depende da fosforilação mediada pela MAPK14 de efetores do EGFR e RAB5A. Referências relacionadas: PMID:16932740
• A MAPK14 fosforila a ADAM17, promovendo a clivagem do ectodomínio de ligantes da família TGF-alfa e a subsequente ativação da sinalização do EGFR. Referências relacionadas: PMID:20188673
• A quinase fosforila CDC25B e CDC25C, levando a um atraso na fase G2 após radiação ultravioleta através da ligação à proteína 14-3-3. Referências relacionadas: PMID:11333986
• A MAPK14 localiza-se tanto no citoplasma quanto no núcleo e é expressa no cérebro, coração, placenta, pâncreas e músculo esquelético, com níveis mais baixos no pulmão, fígado e rim. As isoformas MXI2 e EXIP exibem especificidades de ativação e substrato distintas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi produzido contra um peptídeo fosforilado sintético correspondente ao sítio de fosforilação Y182. Para confirmar a especificidade fosfo, considere tratar as amostras com λ-fosfatase ou usar um peptídeo não fosforilado como controle de bloqueio em experimentos paralelos.
• Para Western blotting, use controles positivos como lisados celulares de culturas estimuladas com indutores de estresse (por exemplo, anisomicina, radiação UV ou citocinas pró-inflamatórias) para induzir uma fosforilação robusta da p38 MAPK em Y182.
• Ao realizar imunofluorescência, otimize cuidadosamente as condições de fixação e permeabilização, pois tratamentos agressivos podem comprometer o epítopo fosfo. Incluir um coquetel de inibidores de fosfatase durante o preparo da amostra pode ajudar a preservar o sinal de fosforilação.
• O anticorpo é qualificado para WB, IF/ICC e ELISA. Para outras aplicações, é recomendada validação adicional no sistema de amostra relevante.

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