Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfo-p38 MAPK (Y182) para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q16539

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Proteína Quinase 14 Ativada por Mitógeno (MAPK14/p38α)

• A MAPK14, também conhecida como p38α, é uma quinase serina/treonina central na via de transdução de sinal da MAP quinase, ativada por citocinas pró-inflamatórias, estresse físico e patógenos. Ela fosforila numerosos fatores de transcrição (ATF1, ATF2, ATF6, ELK1, TP53, MEF2C, MEF2A) e quinases a jusante (MAPKAPK2/MK2, MAPKAPK3/MK3, RPS6KA5/MSK1, RPS6KA4/MSK2) para orquestrar respostas celulares (PubMed:9687510, PubMed:9792677, PubMed:10330143, PubMed:9430721, PubMed:9858528). Referências relacionadas: PMID:9687510 PMID:9792677 PMID:10330143 PMID:9430721 PMID:9858528

• A ativação de quinases a jusante pela MAPK14 leva à remodelação da cromatina e indução de genes de resposta imediata (via fosforilação da histona H3 mediada por MSK1/MSK2), bem como à regulação pós-transcricional através da fosforilação dependente de MK2/MK3 de ZFP36 e ELAVL1 (PubMed:9687510, PubMed:9792677, PubMed:11154262). Referências relacionadas: PMID:9687510 PMID:9792677 PMID:11154262

• A MAPK14 também controla a renovação de proteínas (via ligase de ubiquitina SIAH2, PubMed:17003045), autofagia (através de ATG9, PubMed:19893488), endocitose mediada por clatrina (modulando efetores de RAB5A, PubMed:16932740) e clivagem do ectodomínio (via fosforilação de ADAM17, PubMed:20188673). Referências relacionadas: PMID:17003045 PMID:19893488 PMID:16932740 PMID:20188673

• Esta quinase é essencial para o desenvolvimento vascular placentário no meio da gestação e para a eritropoiese induzida por estresse via regulação de EPO (PubMed:10943842), e promove a piroptose associada ao inflamassoma NLRP1 após colisões ribossomais (PubMed:35857590). Referências relacionadas: PMID:10943842 PMID:35857590

• As isoformas MXI2 e EXIP exibem diversidade funcional: MXI2 é ativada por mitógenos e estresse oxidativo, mas fosforila ELK1 e ATF2 de forma deficiente, enquanto EXIP pode facilitar a apoptose precoce.

• A localização subcelular é predominantemente citoplasmática e nuclear. A MAPK14 é altamente expressa no cérebro, coração, placenta, pâncreas e músculo esquelético, com níveis mais baixos em pulmão, fígado e rim.

• A fosforilação na Tyr-182 (Y182) é um marcador crítico de ativação; o anticorpo reconhece especificamente este epítopo fosfo, tornando-o uma ferramenta valiosa para estudar cascatas de sinalização de estresse e inflamação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo monoclonal de coelho fosfo-específico foi gerado usando um peptídeo fosforilado sintético correspondente à região em torno da Tyr-182 da MAPK14 humana. Espera-se que detecte seletivamente a forma fosforilada (ativa) da p38 MAPK nas aplicações de WB, IHC-P, IF/ICC e ELISA.
• Para Western blotting, a proteína alvo tem um peso molecular previsto de aproximadamente 41 kDa; considere usar lisados de células/tecidos estimulados ou tratados onde a fosforilação da p38 MAPK é induzida para melhorar a detecção do sinal.
• Na imuno-histoquímica e imunofluorescência, métodos de recuperação de antígeno e controle cuidadoso da atividade da fosfatase durante o preparo da amostra podem ser necessários para preservar o epítopo fosfo. Inclua coquetéis de inibidores de fosfatase em tampões de lise e valide o sinal com controles de tratamento com fosfatase.
• Reatividade cruzada foi observada com amostras humanas, de camundongo e rato; a otimização da diluição do anticorpo e das condições de bloqueio é recomendada para cada aplicação e espécie para alcançar a melhor relação sinal-ruído.

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