Anti-Fosfo-p38 MAPK (Y182) Anticorpo Policlonal de Coelho para WB, IHC-P, ELISA - Q16539

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da p38 MAPK (MAPK14)

• MAPK14 (também conhecida como p38 alfa) é uma serina/treonina quinase pertencente à família p38 MAPK, que inclui quatro isoformas: p38 alfa, beta, gama e delta. Ela é ativada por dupla fosforilação em Thr180 e Tyr182 em resposta a sinais de estresse e inflamação.
• A função primária da MAPK14 é transduzir estímulos extracelulares em respostas intracelulares, regulando a expressão gênica, o ciclo celular, a apoptose e a autofagia. Ela fosforila uma vasta gama de substratos, incluindo fatores de transcrição e outras quinases.
• Os alvos a jusante incluem as quinases MSK1 e MSK2, que fosforilam diretamente fatores de transcrição como CREB1 e STAT1, e também fosforilam a histona H3 para facilitar a remodelagem da cromatina em genes imediatos precoces. Referências relacionadas: PMID:9687510, PMID:9792677
• A MAPK14 também ativa MK2 e MK3, que controlam a expressão gênica pós-transcricionalmente através da fosforilação de proteínas de ligação ao mRNA como ZFP36 (tristetraprolina) e ELAVL1, regulando assim a estabilidade e tradução do mRNA.
• No núcleo, a MAPK14 fosforila diretamente os fatores de transcrição ATF1, ATF2 e p53/TP53 para modular programas gênicos responsivos ao estresse. Referências relacionadas: PMID:10330143, PMID:9430721, PMID:9858528
• A MAPK14 está envolvida no controle do ciclo celular; ela fosforila CDC25B e CDC25C, promovendo sua ligação às proteínas 14-3-3 e desencadeando um atraso em G2/M após irradiação por UV. Referências relacionadas: PMID:11333986
• Durante a infecção microbiana, a MAPK14 é fosforilada em células T pelo EsxA de Mycobacterium tuberculosis, levando à inibição da produção de IFN-gama. Referências relacionadas: PMID:21586573
• Subcelularmente, a MAPK14 é encontrada tanto no citoplasma quanto no núcleo. É amplamente expressa, com níveis mais altos no cérebro, coração, placenta, pâncreas e músculo esquelético, e níveis mais baixos no pulmão, fígado e rim. Modificações pós-traducionais incluem fosforilação, acetilação e ubiquitinação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético fosforilado em Y182, garantindo especificidade para a forma ativada da p38 MAPK. Ao gerar anticorpos personalizados específicos para fosfo, considere usar um desenho semelhante com um fosfopeptídeo e uma matriz de afinidade de não-fosfopeptídeo para enriquecer clones específicos para fosfo.
• Para Western blot (WB), espera-se uma banda em aproximadamente 41 kDa. Inclua inibidores de fosfatases durante o preparo da amostra para preservar a fosforilação. Valide a especificidade usando lisatos tratados com fosfatase.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), otimize a recuperação de antígenio e use controles específicos para fosfo apropriados. A reatividade cruzada com humano, camundongo e rato é indicada, mas a validação no sistema de amostra relevante é recomendada.
• Em ELISA, o anticorpo pode ser usado para detecção de p38 MAPK fosforilada em lisatos celulares ou de tecidos. Certifique-se de um bloqueio adequado para minimizar o ruído de fundo.

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