Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Fosfo-p53 (S33) para WB, IHC-P, IP, ELISA - P04637

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do p53

• Codificado pelo gene TP53, o antígeno de tumor celular p53 é um fator de transcrição multifuncional que atua como um potente supressor de tumores, regulando a parada do ciclo celular, reparo de DNA e apoptose em resposta a vários estresses celulares. Referências relacionadas: PMID:11025664 PMID:12524540 PMID:12810724

• O p53 exerce suas funções pró-apoptóticas tanto através da ativação transcricional (por exemplo, BAX e FAS) quanto da repressão (por exemplo, Bcl-2), com sua atividade modulada por interações com proteínas da família ASPP. Referências relacionadas: PMID:12524540 PMID:17189187

• Além da transcrição nuclear, o p53 também se localiza no citoplasma, mitocôndrias, retículo endoplasmático e centrossomos, refletindo seu envolvimento na apoptose e necrose não transcricionais.

• O p53 é expresso de forma onipresente nos tecidos humanos normais, com vários isoformas alternativos exibindo padrões de expressão dependentes do tecido.

• Modificações pós-traducionais principais incluem fosforilação, acetilação, metilação e ubiquitinação, que regulam estritamente a estabilidade do p53, localização subcelular e atividade transcricional.

• O p53 contribui para a regulação do relógio circadiano reprimindo a ativação transcricional mediada por CLOCK-BMAL1 de PER2. Referências relacionadas: PMID:24051492

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfopeptídeo sintético correspondente aos resíduos ao redor do Ser33 do p53 humano. Para validar a especificidade de fosfo, considere usar amostras tratadas com fosfatase lambda ou competição com não-fosfopeptídeo em paralelo.
• Para western blot (WB), o tamanho da banda previsto é de ~53 kDa (p53 canônico) ou 44 kDa (alguns isoformas); as bandas podem mudar ligeiramente devido à fosforilação e outras modificações.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), as condições de recuperação de antígenio e a fixação do tecido podem afetar a detecção de epítopos fosforilados; otimize usando controles positivos conhecidos, como tecidos tratados com radiação ou estresse genotóxico.
• Ao realizar imunoprecipitação (IP) ou ELISA, inclua controles de IgG apropriados e considere o emparelhamento com um anticorpo total de p53 para avaliar a estequiometria da fosforilação.
• Este anticorpo apresenta reatividade cruzada com o p53 de camundongo e rato, tornando-o adequado para estudos translacionais; no entanto, confirme sempre a reatividade cruzada em seu sistema modelo específico.

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