Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfo-p53 (T55) para WB e ELISA - P04637

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da p53

• A p53, também conhecida como antígeno tumoral celular p53, fosfoproteína p53 e supressor tumoral p53, é um fator de transcrição multifuncional codificado pelo gene TP53. Desempenha um papel crítico na supressão tumoral ao induzir paragem do ciclo celular, reparação de DNA ou apoptose em resposta ao stress celular. Referências relacionadas: PMID:11025664 PMID:12524540 PMID:12810724
• Um dos seus mecanismos chave é a regulação negativa da divisão celular através do controlo da expressão de genes necessários para este processo, incluindo a ativação de um inibidor de cinase dependente de ciclina. Isto leva à paragem do ciclo celular no ponto de verificação G1/S. Referências relacionadas: PMID:11025664 PMID:12524540 PMID:12810724
• A p53 induz apoptose através da estimulação da expressão do antigénio BAX e FAS, ou pela repressão da expressão de Bcl-2. A sua atividade pró-apoptótica é potenciada pela interação com PPP1R13B/ASPP1 ou TP53BP2/ASPP2 e inibida por PPP1R13L/iASPP. Referências relacionadas: PMID:12524540 PMID:17189187
• A proteína localiza-se em múltiplos compartimentos subcelulares, incluindo o núcleo, citoplasma, mitocôndrias, retículo endoplasmático e centríolos. Esta distribuição dinâmica está ligada às suas diversas funções reguladoras na transcrição, apoptose e metabolismo.
• A p53 sofre extensas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação, metilação e ubiquitinação, que modulam a sua estabilidade, afinidade de ligação ao DNA e atividade transcricional. O local de fosforilação da treonina 55 (T55) é relevante para o estudo da sinalização de ativação da p53.
• As isoformas da p53 (isoformas 2, 3, 4, 7, 8, 9) exibem expressão dependente do tecido e funções reguladoras distintas, como potenciar ou suprimir a atividade de transativação da isoforma 1, contribuindo para a complexidade das redes de sinalização da p53.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi gerado usando um fosfopeptídeo sintético correspondente à T55 da p53 humana. Foi concebido para detetar a fosforilação neste local; considere o uso de amostras tratadas com fosfatase como controlo negativo para confirmar a especificidade.
• Para western blotting (WB), valide contra lisados de células conhecidas por expressarem fosfo-p53 em condições de dano no ADN (por exemplo, tratamento com etoposídeo ou irradiação UV). O peso molecular previsto é de ~44 kDa, mas as formas fosforiladas podem exibir ligeiros desvios.
• Em aplicações ELISA, imobilize o anticorpo ou o antigénio peptídico adequadamente e inclua controlos de peptídeo não fosforilado para avaliar a ligação específica ao fosfo.

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