Anticorpo policlonal de coelho Anti-Fosfo-p70 S6 Kinase 1-S371 para WB e ELISA - P23443

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da p70 S6 Kinase 1

• RPS6KB1 (p70 S6 kinase 1) é uma serina/treonina quinase que atua a jusante da sinalização de mTORC1 em resposta a fatores de crescimento e nutrientes, promovendo proliferação celular, crescimento e progressão do ciclo celular. Referências relacionadas: PMID:11500364 PMID:12801526 PMID:14673156
• Regula a tradução dependente de capota ao fosforilar EIF4B, RPS6, e ao inibir EEF2K, ativando assim EEF2, além de promover a primeira rodada de tradução via POLDIP3/SKAR. Referências relacionadas: PMID:11500364 PMID:12801526 PMID:14673156 PMID:15341740
• Sob privação de nutrientes, a RPS6KB1 inativa se liga ao complexo EIF3; após estimulação mitogênica, a fosforilação por mTORC1 causa dissociação e ativação. Referências relacionadas: PMID:16286006
• A quinase medeia a sobrevivência celular ao fosforilar o fator pró-apoptótico BAD (por similaridade), e ao fosforilar URI1 mitocondrial para liberar PP1CC, que desfosforila RPS6KB1 em Thr-412 em um loop de feedback negativo. Referências relacionadas: PMID:17936702
• RPS6KB1 participa da inibição por feedback da sinalização mTORC2/AKT ao fosforilar SIN1, MTOR, RICTOR e DEPTOR. Referências relacionadas: PMID:15899889 PMID:19720745 PMID:19935711 PMID:22017876
• Contribui para a resistência à insulina induzida por TNF ao fosforilar IRS1 em resíduos de serina, levando à degradação de IRS1. Referências relacionadas: PMID:18952604
• A quinase fosforila e ativa CAD, uma enzima chave na biossíntese de pirimidinas, e EPRS para promover a captação de ácidos graxos em adipócitos. Referências relacionadas: PMID:23429703 PMID:28178239
• Subcelularmente, RPS6KB1 se localiza no citoplasma, núcleo, membrana externa mitocondrial e sinapse, refletindo seus diversos papéis na sinalização.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo fosforilado sintético correspondente à Ser371 do RPS6KB1 humano; recomendamos validar a especificidade do anticorpo para a forma fosforilada usando lisados tratados com fosfatase ou peptídeo não fosforilado competitivo.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de aproximadamente 59 kDa (embora possa migrar em torno de 70 kDa devido à fosforilação). Inclua inibidores de protease e fosfatase durante a preparação da amostra.
• Para ELISA, considere usar o peptídeo fosforilado como controle positivo e o peptídeo não fosforilado para avaliar a especificidade por fosforilação.
• Valide a reatividade cruzada em amostras de camundongo de forma independente; as sequências humanas e de camundongo são altamente conservadas ao redor de Ser371.
• A otimização da diluição do anticorpo e das condições de bloqueio pode ser necessária para diferentes configurações experimentais.

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