Anticorpo monoclonal de coelho Anti-Fosfo-p90Rsk/RSK1/RPS6KA1 (S380) para WB, ELISA - Q15418

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de RPS6KA1 (RSK1)

• RPS6KA1 (RSK1) é uma serina/treonina quinase da família das quinases p90 ribossomal S6, também conhecida como p90RSK1, MAPKAPK1 e RSK1, codificada pelo gene RPS6KA1; o splicing alternativo gera múltiplas isoformas.
• Atua a jusante da sinalização de ERK1/2 (MAPK3/MAPK1) para mediar a ativação mitogênica e induzida por estresse dos fatores de transcrição CREB1, ETV1/ER81 e NR4A1/NUR77, acoplando assim a cascata MAPK à regulação transcricional. Referências relacionadas: PMID:10679322 | PMID:12213813 | PMID:15117958
• Regula a tradução dependente de capítulo ao fosforilar a proteína ribossomal S6 (RPS6) por meio de um mecanismo independente de mTOR e o fator de iniciação da tradução eucariótica 4B (EIF4B), aumentando sua afinidade pelo complexo EIF3. Referências relacionadas: PMID:17360704 | PMID:16763566
• Modula a sinalização de mTOR ao fosforilar diretamente TSC2 em Ser1798 (inibindo sua atividade GAP) e fosforilar RPTOR e DEPTOR, influenciando assim as atividades de mTORC1 e mTORC2. Referências relacionadas: PMID:15342917 | PMID:22017876
• Promove a sobrevivência celular ao fosforilar e inativar os fatores pró-apoptóticos BAD e DAPK1, e suporta a sobrevivência de células estreladas hepáticas por meio da fosforilação de CEBPB. Referências relacionadas: PMID:10679322 | PMID:16213824 | PMID:11684016
• Regula a progressão do ciclo celular ao fosforilar CDKN1B (p27Kip1), promovendo sua ligação a 14-3-3 e retenção citoplasmática, e controla a migração celular por meio da fosforilação de EPHA2 em Ser897. Referências relacionadas: PMID:18508509 | PMID:18813292 | PMID:26158630
• Se localiza tanto no núcleo quanto no citoplasma, permitindo funções duplas na regulação transcricional e na sinalização citoplasmática.
• Contém dois domínios quinase não idênticos, requer ATP e magnésio para atividade, e é regulado por múltiplos eventos de fosforilação, incluindo Ser380 na região ligante que é crítica para a ativação.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fosfo-peptídeo sintético ao redor de Ser380 de RSK1 humano; considere usar tratamento com lambda fosfatase ou mutantes não fosforiláveis de Ser380 em WB para confirmar a fosfo-especificidade.
• Para WB, o peso molecular previsto é de ~83 kDa; use marcadores de peso molecular apropriados e valide com controles positivos conhecidos (por exemplo, células estimuladas por EGF) devido aos deslocamentos de mobilidade dependentes da fosforilação de RSK1.
• Em ELISA, otimize as condições de revestimento (pH, concentração de peptídeo) para manter a integridade do fosfo-epítopo, e inclua controles de peptídeo não fosforilados para garantir a especificidade.
• Reage cruzadamente com RSK1 de camundongo e rato; verifique a homologia de sequência ao redor do sítio de fosforilação para essas espécies para antecipar a detecção.

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