Phosphorylated Antibodies
Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfo-PAK1/2/3 (S144/S141/S139) para WB e ELISA - Q13153 / Q13177 / O75914
Número do item : CM0001673
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- Aplicação
- WB, ELISA
- Reatividade Cruzada
- Humano, Rato, Camundongo
- Peso Proteico
- 65kDa
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Especificações e Parâmetros Principais do Produto
| Parâmetro | Valor |
|---|---|
| Nome do Produto | mAb de Coelho Phospho-PAK1/2/3-S144/S141/S139 |
| Observações/Apelido | PAKalpha; Phospho-PAK1/2/3-S144/S141/S139 |
| Espécie | Humano |
| GeneID (Humano) | 5058/5062/5063 |
| GeneID | 5058/5062/5063 |
| Imunógeno | Um peptídeo fosforilado sintético ao redor de S144 da PAK1 humana (Q13153) |
| Origem | Coelho |
| Categoria | Anticorpos Fosforilados |
| Aplicação | WB, ELISA |
| Reatividade Cruzada | Humano, Camundongo, Rato |
| SWISS | Q13153/Q13177/O75914 |
| Peso da Proteína | 65kDa |
| Envio | Saco de gelo |
Contexto Biológico: Função e Localização da PAK1
- PAK1 (p21-activated kinase 1, alfa-PAK) é uma serina/treonina-proteína quinase que, junto com PAK2 e PAK3, pertence à família PAK. Este anticorpo reconhece a forma fosforilada do resíduo de serina conservado equivalente a S144 na PAK1, S141 na PAK2 e S139 na PAK3, que são críticos para a ativação da quinase.
- Ativada pelas Rho GTPases CDC42 e RAC1, a PAK1 conecta sinais extracelulares a vias intracelulares que controlam a dinâmica do citoesqueleto, a adesão celular e a migração.
Referências relacionadas: PMID:8805275 PMID:9528787 - A PAK1 reorganiza o citoesqueleto de actina promovendo a formação de fibras de estresse e adesões focais, regulando assim a forma e a motilidade celular.
Referências relacionadas: PMID:9032240 PMID:9395435 - A quinase regula a apoptose por meio da fosforilação da RAF1, que por sua vez fosforila o BAD e promove seu sequestro mitocondrial.
Referências relacionadas: PMID:11733498 - Subcelularmente, a PAK1 se localiza no citoplasma, junções celulares, lamelipódios, membranas de ruffle, invadopódios, núcleo e centrossomo, o que corresponde aos seus papéis multifacetados na sinalização e na estrutura celular.
- As modificações pós-traducionais incluem autofosforilação em múltiplos resíduos de serina/treonina (incluindo S144) e acetilação, que modulam a atividade e a localização.
- Clinicamente, a PAK1 está superexpressa no câncer gástrico, promovendo invasão e migração, e tem sido associada a distúrbios neurológicos.
Referências relacionadas: PMID:25766321
Orientações Experimentais e Dicas Técnicas
- Para Western blotting, use coquetéis de inibidores de protease e fosfatase durante a lise de células/tecidos para preservar o estado de fosforilação. A banda esperada para PAK1 é de aproximadamente 65 kDa, mas podem ocorrer pequenas variações de tamanho entre espécies ou devido a modificações pós-traducionais.
- A especificidade do sinal fosfo pode ser confirmada tratando as amostras com λ-fosfatase ou por meio de ensaios de competição peptídica usando o peptídeo imunógeno não fosforilado.
- No ELISA, use um peptídeo fosforilado correspondente ao imunógeno como antígeno de revestimento e inclua controles apropriados (peptídeo não fosforilado, branco) para avaliar a especificidade do anticorpo.
- Como o anticorpo reconhece um fosfo-sítio conservado compartilhado por PAK1/2/3, é aconselhável verificar a identidade da isoforma no seu sistema usando anticorpos totais de PAK específicos para isoforma ou silenciamento por siRNA.
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Folha de Dados do Produto
Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Fosfo-PAK1/2/3 (S144/S141/S139) para WB e ELISA - Q13153 / Q13177 / O75914
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